公开(公告)号：CN117660293A

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202311658679.9

申请日：2023-12-06

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 齐凤慧 ,  李晴 ,  刘晓诺 ,  郭欣悦 ,  詹亚光 ,  曹源 ,  张开放 ,  孔繁秋 ,  张晨曦

IPC: C12N5/04 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种利用胚性细胞诱导水曲柳体细胞胚发生的方法，该方法选择以水曲柳胚性细胞为材料，通过均一化和增殖培养获得生长状态相同的水曲柳胚性细胞，所选培养基为WPM+60g/L蔗糖+0.05‑1.0g/L水解酪蛋白+6.0g/L琼脂+1.5g/L活性炭的培养基中；之后将胚性细胞转入水曲柳体细胞胚成熟培养基(WPM+0.05‑0.2mg/L NAA+1.0‑3.0mg/L ZT+0.05‑0.5mg/LGA3+30g/L蔗糖+6.0g/L琼脂+1.5g/L活性炭)中进行培养，获得球形胚、心形胚、鱼雷型胚、子叶胚和成熟体胚，最后获得水曲柳苗。在胚性细胞均一化培养和体细胞胚成熟培养中，均可以采用固体培养法和固液混合培养法，该方法可以使90％胚性细胞发育成成熟体胚。本发明克服了水曲柳体胚诱导过程中材料单一并受季节限制的问题，同时减少了畸形胚的比例，为水曲柳优良品种规模化繁殖奠定基础。