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公开(公告)号：CN117343931A
公开(公告)日：2024-01-05
申请号：CN202311155235.3
申请日：2023-09-08
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种叶组织特异高表达的Rubisco小亚基基因启动子及其应用，属于植物基因工程领域。本发明以小黑杨(Populus×xiaohei T.S.Hwang et Liang)为植物材料，首次成功克隆了一个叶组织特异高表达启动子rbcS，其序列如SEQ ID NO.1所示，并成功构建了Rubisco小亚基基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化烟草及GUS染色验证，证明该启动子在植物叶中特异性高表达。本发明启动子为植物叶发育研究和新品种转基因育种提供了一种新的工具和选择。
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公开(公告)号：CN109504674A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201710825845.8
申请日：2017-09-14
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/1003
Abstract: 本发明属于植物分子生物学领域，涉及一种适用于杨树干种子核酸提取的提取液配方及使用方法。其特征是由以下成分及其含量组成(A组分和B组分)：100ml A组分由以下部分组成：丙酮40ml，甘油10ml，0.5M NaAc 40ml，1mM乙二胺四乙酸二钠10ml；100ml B组分由以下部分组成：盐酸胍35ml，2.5M NaCl20ml，0.5mM乙二胺四乙酸二钠5ml，苯酚10ml，2mM Tris-cl(PH＝8)30ml。本发明能够从多年储藏的杨树干种子中提取完整的mRNA，同时本发明对提取烟草及拟南芥等植物干种子mRNA的提取也有很好的效果。
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公开(公告)号：CN106332747A
公开(公告)日：2017-01-18
申请号：CN201511027616.9
申请日：2015-12-30
IPC: A01G31/00
CPC classification number: A01G24/00
Abstract: 本发明属于植物组织培养领域，涉及一种适用于小黑杨水培的固体粉末培养基。其特征是由以下成分及含量组成：A成分：K2HPO4`3H2O0.04mM，KH2PO40.6mM，MgSO4`7H2O mM，0.2EDTA 铁钠 0.01mM，MnSO4`H2O 0.002mM，H3BO3 0.01mM，Na2MoO4`2H2O 0.01mM，ZnSO4`7H2O 0.0005mM，CuSO4`5H2O0.0005mM；B 成 分：KCl 0.5mM，CaCl20.8mM，NH4NO3 0.5mM。调节PH值为6-7。本发明能够提高小黑杨水培条件下的根伸长量及鲜重，加快地上部分生长，提高杨树苗木由复壮效果，促进杨树苗木繁殖。
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公开(公告)号：CN106754952B
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201611045376.X
申请日：2016-11-24
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415
Abstract: 吉尔吉斯白桦叶绿体伴侣蛋白60亚基β4基因及其编码蛋白，它属于生物技术领域。吉尔吉斯白桦BkCPN60β4基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。其的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。本发明中吉尔吉斯白桦BkCPN60β4基因的编码区长度为1248bp，编码415个氨基酸，亚细胞定位表明BkCPN60β4蛋白定位在细胞核和细胞质，BkCPN60β4基因成功转化拟南芥，转基因株系BkCPN60β4基因的表达量高于野生型(WT)，1.5mmol/L和3.0mmol/L NaHCO3处理转基因拟南芥与野生型株系，表明转BkCPN60β4基因的拟南芥能够提高对NaHCO3的耐受性。
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公开(公告)号：CN101294165B
公开(公告)日：2011-04-27
申请号：CN200810064790.4
申请日：2008-06-23
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 一种构建pROK？II植物双价表达载体的方法及其使用的通用引物，它涉及一种植物双价表达载体的方法及其使用的通用引物。它解决了目前构建pROKII双价载体的方法需要通过中间载体更换酶切位点才能实现，步骤繁琐、构建周期长的问题。方法：一、构建单价载体；二、制备两边带有EcoR？I粘末端的35S-A-Tnos片段；三、制备两边带有EcoR？I粘末端的开环B/pROK？II；四、将步骤二和三得到的基因片段进行酶连接。通用引物为P35S-S1和Tnos-A1。本发明方法与目前构建pROKII双价载体的方法相比较，减少了连接和转化的次数具有步骤少、操作简单、构建周期短和不必更换酶切位点的优点，能够明显地提高工作效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101407823A
公开(公告)日：2009-04-15
申请号：CN200810209569.3
申请日：2008-11-28
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/81
Abstract: 一种构建酵母双价通用表达载体的方法，它涉及一种构建双价表达载体的方法。本发明解决了现有构建载体的方法不能构建出可以表达任意目的基因的通用载体的问题。本发明构建酵母双价通用表达载体的方法按照以下步骤进行：一、根据酵母表达载体pYES2序列分别设计引物，进行PCR扩增获得目的片段PGAL1和目的片段CYC1；二、得到质粒pMD18－PGAL1；三、获得质粒pMD18－PC；四、双酶切后回收目的片段和质粒pYES2并连接；获得酵母双价通用表达载体pYES2－PC。用本发明的方法构建出的通用双价载体能够准确表达连接的基因，只需要将目的基因片段直接连接在本发明构建的通用双价表达载体上就可以准确表达。
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公开(公告)号：CN118995802A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411429528.0
申请日：2024-10-14
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种通过过量表达蔗糖转运蛋白基因提高杨树木材材性和氮素利用能力的方法。所述方法是在毛果杨中过量表达蔗糖转运蛋白基因PtrSUT3，获得高纤维素含量和高氮素利用能力的转基因毛果杨；所述蔗糖转运蛋白基因PtrSUT3的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在毛果杨中过量表达蔗糖转运蛋白基因PtrSUT3，有效地为纤维素的生物合成提供了前体物质，使过量表达蔗糖转运蛋白基因PtrSUT3的毛果杨纤维素含量显著高于野生型植株。且通过本发明方法得到的转基因杨树表现出较高的氮素利用能力，证实本发明方法是一种高效、可持续的解决杨树在氮素缺乏的边缘地区生存问题的有效途径，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN109576262A
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201710893763.7
申请日：2017-09-28
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10
CPC classification number: C12N15/1003
Abstract: 本发明属于植物分子生物学领域，涉及一种广泛适用于植物野外取样的保存配方。其特征是由以下成分及其含量组成：A组分：50mM Tris-HCl(PH＝8.0)，1mM Na2EDTA，100mM葡萄糖，5％甘油，硼酸-四硼酸钠缓冲液0.025mM，NaCl 1.6mM，CATB 0.5％(m/v)；B组分：琼脂粉。本发明能够保证外界不超过50℃，时间不超过72h的情况下可以完整保存任何植物样本RNA的完整性，且该溶液不会产生明显气味，对人体无害，在运输过程中也无易燃易爆等任何危害，可以携带上汽车火车等通用交通工具，也可以通过飞机等方式运输。回到实验室后，可通过专门的提取液将样品中的核酸提取出来，核酸质量可以达到建库标准。
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公开(公告)号：CN106754952A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611045376.X
申请日：2016-11-24
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415
Abstract: 吉尔吉斯白桦叶绿体伴侣蛋白60亚基β4基因及其编码蛋白，它属于生物技术领域。吉尔吉斯白桦BkCPN60β4基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。其的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No：2所示。本发明中吉尔吉斯白桦BkCPN60β4基因的编码区长度为1248bp，编码415个氨基酸，亚细胞定位表明BkCPN60β4蛋白定位在细胞核和细胞质，BkCPN60β4基因成功转化拟南芥，转基因株系BkCPN60β4基因的表达量高于野生型(WT)，1.5mmol/L和3.0mmol/L NaHCO3处理转基因拟南芥与野生型株系，表明转BkCPN60β4基因的拟南芥能够提高对NaHCO3的耐受性。
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公开(公告)号：CN101407823B
公开(公告)日：2010-08-11
申请号：CN200810209569.3
申请日：2008-11-28
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/81
Abstract: 一种构建酵母双价通用表达载体的方法，它涉及一种构建双价表达载体的方法。本发明解决了现有构建载体的方法不能构建出可以表达任意目的基因的通用载体的问题。本发明构建酵母双价通用表达载体的方法按照以下步骤进行：一、根据酵母表达载体pYES2序列分别设计引物，进行PCR扩增获得目的片段PGAL1和目的片段CYC1；二、得到质粒pMD18-PGAL1；三、获得质粒pMD18-PC；四、双酶切后回收目的片段和质粒pYES2并连接；获得酵母双价通用表达载体pYES2-PC。用本发明的方法构建出的通用双价载体能够准确表达连接的基因，只需要将目的基因片段直接连接在本发明构建的通用双价表达载体上就可以准确表达。
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