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公开(公告)号:CN107099850A
公开(公告)日:2017-08-29
申请号:CN201710463397.1
申请日:2017-06-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C40B50/06 , C12N15/113
CPC classification number: C12N15/1082 , C12N15/113 , C12N2310/10 , C40B50/06
Abstract: 一种通过酶切基因组构建CRISPR/Cas9基因组敲除文库的方法,涉及一种基因组敲除文库的构建方法。是要解决现有敲除文库构建方法存在物种基因信息不完善、人工设计覆盖度低且耗时耗力的问题。方法:一、构建Mspl.f‑library文库;二、获得20bp gRNA靶序列片段;三、构建PAM‑f.library文库;四、Lenti‑gRNA‑library文库构建。本发明获得gRNA文库的方法不依赖于已知物种基因组序列信息,避免了物种基因信息不完善、人工设计覆盖度低且耗时耗力等缺点,大大提高敲除文库的覆盖率。本发明用于构建CRISPR/Cas9基因组敲除文库。
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公开(公告)号:CN107099850B
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201710463397.1
申请日:2017-06-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C40B50/06 , C12N15/113
Abstract: 一种通过酶切基因组构建CRISPR/Cas9基因组敲除文库的方法,涉及一种基因组敲除文库的构建方法。是要解决现有敲除文库构建方法存在物种基因信息不完善、人工设计覆盖度低且耗时耗力的问题。方法:一、构建Mspl.f‑library文库;二、获得20bp gRNA靶序列片段;三、构建PAM‑f.library文库;四、Lenti‑gRNA‑library文库构建。本发明获得gRNA文库的方法不依赖于已知物种基因组序列信息,避免了物种基因信息不完善、人工设计覆盖度低且耗时耗力等缺点,大大提高敲除文库的覆盖率。本发明用于构建CRISPR/Cas9基因组敲除文库。
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