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公开(公告)号：CN104396592A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410755243.6
申请日：2014-12-11
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种土壤中大豆根瘤菌分离和固氮活性同步检测新方法。选用生产中应用的大豆品种并用无菌水洗净后晾干，超净工作台中，用0.1%的升汞反复消毒3次以上。把蛭石装入直径10cm的塑料营养钵中在高温、高压蒸汽灭菌锅中灭菌，把消毒后的大豆种子分别粘取土壤和根瘤菌，用消毒种子做对照，同时播种在营养钵中，并装入带有透气灭菌盖的无菌袋中，方入光照培养箱中养，定期定量浇入灭菌后的霍格兰营养液，至大豆第4片复叶完全展开，若对照不结根瘤，则测定粘取土壤并结瘤大豆的根瘤固氮酶活性，同时分离该根瘤中的根瘤菌并进行16srDNA鉴定，与根瘤菌所结根瘤的固氮酶活性进行比对，保留分离获得的高固氮活性大豆根瘤菌。
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公开(公告)号：CN103881930A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410123023.1
申请日：2014-03-28
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供了一种白僵菌的固体培养基以及白僵菌的培养方法，其中，本发明的固体培养基包括按质量比1：（1～1.2）：（1～1.2）的蛭石、麦麸以及玉米粉，将蛭石、麦麸以及玉米粉混合蒸汽灭菌40min得到；在此基础上，本发明将白僵菌接种液在加有硫酸庆大霉素的液体扩大培养基培养后，再接种于固体培养基中，在25～27℃培养7.5～8d后收获。本发明固体培养基具有良好的保湿性和透气性，能为白僵菌增殖提供丰富的N源和C源营养，原料经济易得。本发明的培养方法，操作简单，流程清晰，对生产环境和生产设备要求不高，生产成本较低，生产周期较短，在生产中不需要对培养基进行倒料，杜绝了生产中杂菌的污染问题，非常适合小型企业和生产单位快速生产白僵菌。
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公开(公告)号：CN104396592B
公开(公告)日：2016-10-05
申请号：CN201410755243.6
申请日：2014-12-11
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供一种土壤中大豆根瘤菌分离和固氮活性同步检测方法。将大豆用无菌水洗净后晾干，在无菌风下，用质量浓度0.1％的升汞反复消毒3次以上待用。把蛭石灭菌后，再将消毒后的大豆种子分别粘取土壤和生产中应用的根瘤菌，用不粘任何土壤及根瘤菌的消毒种子做对照，同时播种在营养钵中，并装入带有透气灭菌盖的无菌袋中，在光照培养箱中培养，定期定量浇入灭菌后的霍格兰营养液，直至大豆第4片复叶完全展开，若对照不结根瘤，则采用乙炔还原法测定粘取土壤并结瘤大豆的根瘤固氮酶活性，同时分离该根瘤中的根瘤菌并进行16s rDNA鉴定，与粘取生产中应用的根瘤菌的大豆所结根瘤的固氮酶活性进行对比，保留分离获得的高固氮活性大豆根瘤菌。
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