公开(公告)号：CN109136403A

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201811167483.9

申请日：2018-10-08

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 殷秀杰 ,  燕昌江 ,  张鸣宇 ,  贺涛涛 ,  衣琨 ,  李旭 ,  任毅晓 ,  孙博扬

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/29 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开一种用于高加索三叶草PCR表达分析的内参基因及构建方法，内参基因其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示；构建方法，如下：利用高加索三叶草7个组织转录组数据，选择7个表达稳定的内参基因，同时选用在三叶草属中常用的1个传统内参基因作为对照；将上述候选内参基因进行引物设计，对每个cDNA进行常规PCR扩增，得到引物的扩增效率和扩增到达阈值的循环数；对获得的数据进行内参基因稳定性评估分析，最终筛选到特定试验条件下最合适的内参基因和内参基因数。该内参基因做参照物用于检测高加索三叶草基因表达水平变化，用于校正上样量和上样过程中存在的试验误差，保证实验结果的准确性。

公开(公告)号：CN109136403B

公开(公告)日：2019-09-24

申请号：CN201811167483.9

申请日：2018-10-08

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 殷秀杰 ,  燕昌江 ,  张鸣宇 ,  贺涛涛 ,  衣琨 ,  李旭 ,  任毅晓 ,  孙博扬

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/29 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开一种用于高加索三叶草PCR表达分析的内参基因及构建方法，内参基因其核苷酸序列如序列表SEQ ID No.2所示；构建方法，如下：利用高加索三叶草7个组织转录组数据，选择7个表达稳定的内参基因，同时选用在三叶草属中常用的1个传统内参基因作为对照；将上述候选内参基因进行引物设计，对每个cDNA进行常规PCR扩增，得到引物的扩增效率和扩增到达阈值的循环数；对获得的数据进行内参基因稳定性评估分析，最终筛选到特定试验条件下最合适的内参基因和内参基因数。该内参基因做参照物用于检测高加索三叶草基因表达水平变化，用于校正上样量和上样过程中存在的试验误差，保证实验结果的准确性。