公开(公告)号：CN105039275A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510582302.9

申请日：2015-09-14

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘慧民 ,  张娇 ,  王大庆 ,  聂颖 ,  刘记璇 ,  刘冰冰

IPC: C12N9/08

CPC classification number: C12N9/0065 ,  C12Y111/01009

Abstract: 一种分离纯化谷胱甘肽过氧化物酶的方法，涉及利用双向电泳技术在金山绣线菊中分离纯化谷胱甘肽过氧化物酶的方法。通过该技术分离纯化此酶，比传统的柱层析等方法具有更高的精确性、可操作性和先进性。方法：一、金山绣线菊梯度低温处理；二、金山绣线菊叶片蛋白提取；三、蛋白定量与纯化；四、第一向固相PH梯度等电聚焦电泳；五、第二向SDS-PAGE凝胶电泳；六、凝胶平衡与染色；七、凝胶扫描和图像分析；八、目标蛋白酶解与脱水；九、目标蛋白重结晶与纯化，完成分离纯化过程。用该方法使提取的蛋白酶具更高纯度、更多数量和更优科研价值，此方法提取纯化蛋白酶可用于酶活性、氧化还原与清除氧自由基机理、抗逆机制、抗逆基因克隆、蛋白组学等研究。