公开(公告)号：CN104561054A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201510008280.5

申请日：2015-01-08

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 刘慧民 ,  刘计璇 ,  王大庆 ,  聂颖 ,  苏青 ,  房莉 ,  仉茜 ,  张娇 ,  李小婷 ,  刘冰冰

IPC: C12N15/53 ,  C12N15/10

Abstract: 一种由谷胱甘肽过氧化物酶克隆编码该酶的基因的方法，涉及由园林植物华北绣线菊克隆谷胱甘肽过氧化物酶基因的方法。本发明通过鉴定的抗寒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶克隆抗寒基因，比传统的基因克隆方法具有更高的特异性和准确性。方法：一、提取绣线菊总RNA；二、设计简并引物；三、基因中间片段的克隆；四、基因3’RACE克隆；五、基因5’RACE克隆；六、序列拼接获得基因全长，即完成谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆。本发明方法所克隆出的谷胱甘肽过氧化物酶基因受低温诱导，表达量显著增加，因此具有增强绣线菊抗寒能力的功能，为提高绣线菊抗寒能力和培育绣线菊新品种奠定基础，可应用于绣线菊抗寒基因工程和分子育种领域。