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发明公开
一种由改进的piggyBac转座子介导的基因整合方法及其应用审中-实审

公开(公告)号：CN118186001A

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202410279175.4

申请日：2024-03-12

Applicant: 上海市东方医院(同济大学附属东方医院)

Inventor： 李利妹 , 周斌 , 闫宏伟 , 连少强

IPC: C12N15/85 , A01K67/0275

Abstract: 本发明公开了一种由改进的piggyBac转座子介导的基因整合方法及其应用，涉及基因工程技术领域，其技术要点为：所述方法包括以下步骤：S1、高效piggyBac转座系统的构建，即通用载体系统的构建；S2、利用高效piggyBac转座系统建立稳转细胞系/株、有关转基因动物以及在基因治疗领域的潜在应用。本发明的方法将现有的piggyBac转座子进行改造提高其整合基因组的能力，不但整合编辑工具效率高，而且只需构建一种载体即可整合到宿主细胞的基因组在不同位点，利于一次性高效地筛选到最佳整合位点的克隆；另外，还可以通过反向PCR(reverse‑PCR)技术鉴定出插入位点。本发明的方法由改进的piggyBac转座子介导基因整合的策略具有效率高、操作简单、位点易鉴定等优势。

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