公开(公告)号：CN103468636B

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201310443433.X

申请日：2013-09-26

Applicant: 上海大学

Inventor： 杨明 ,  裘文慧 ,  陈静思 ,  潘辰苑 ,  雷湘杰 ,  吴明红

IPC: C12N5/071 ,  C12Q1/04 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明提供一种生物工程技术领域的鲤鱼原代巨噬细胞的提取和鉴定方法，即，选鲤鱼进行解剖，无菌取头肾并剪碎，经细胞筛过滤得细胞悬液，后经离心洗涤，加入细胞培养液得到新的细胞悬液；用血小球计数板进行计数，再以最适培养条件铺板法培养增殖，最后对得到的原代巨噬细胞多种方法镜检鉴定。本发明直接无菌取鲤鱼头肾，进行铺板法培养以提取巨噬细胞，经鉴定，确实得到了数量多、纯度高的离体鲤鱼原代巨噬细胞，保证了所提取离体细胞的成活率，为进一步开展鲤鱼巨噬细胞毒理试验及其他实验打下基础。

公开(公告)号：CN103468636A

公开(公告)日：2013-12-25

申请号：CN201310443433.X

申请日：2013-09-26

Applicant: 上海大学

Inventor： 杨明 ,  裘文慧 ,  陈静思 ,  潘辰苑 ,  雷湘杰 ,  吴明红

IPC: C12N5/071 ,  C12Q1/04 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明提供一种生物工程技术领域的鲤鱼原代巨噬细胞的提取和鉴定方法，即，选鲤鱼进行解剖，无菌取头肾并剪碎，经细胞筛过滤得细胞悬液，后经离心洗涤，加入细胞培养液得到新的细胞悬液；用血小球计数板进行计数，再以最适培养条件铺板法培养增殖，最后对得到的原代巨噬细胞多种方法镜检鉴定。本发明直接无菌取鲤鱼头肾，进行铺板法培养以提取巨噬细胞，经鉴定，确实得到了数量多、纯度高的离体鲤鱼原代巨噬细胞，保证了所提取离体细胞的成活率，为进一步开展鲤鱼巨噬细胞毒理试验及其他实验打下基础。

公开(公告)号：CN102628764A

公开(公告)日：2012-08-08

申请号：CN201210098196.3

申请日：2012-04-06

Applicant: 上海大学

Inventor： 杨明 ,  裘文慧 ,  许海 ,  沈杨 ,  潘辰苑 ,  邵海洋 ,  吴明红

IPC: G01N1/40 ,  G01N1/34

Abstract: 本发明提供了一种水体中病毒的浓缩分离方法，该方法为：过滤待测水样，以除去其中的悬浮物，加入氯化钠和六水氯化铝，使其终浓度分别达到1%M和0.005~0.01mol/L，4℃静置过夜后，离心分离，弃上清，沉淀物用0.01M、pH=10.5的甘氨酸—EDTA缓冲液洗脱，离心分离，取上清，调节pH至7.2，冷冻保存。该方法不仅能够直接用于环境水体中的病高效毒浓缩分离，而且具有步骤简单、无需特殊设备、操作方便、适用于普通实验室等优点，为快速检测环境介质中病毒、预防疾病爆发提供强有力的技术支持。

公开(公告)号：CN102382904A

公开(公告)日：2012-03-21

申请号：CN201110325961.6

申请日：2011-10-25

Applicant: 上海大学

Inventor： 杨明 ,  裘文慧 ,  许海 ,  沈杨 ,  潘辰苑 ,  吴明红

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 本发明公开了一种脊髓灰质炎病毒的检测方法。该方法以样待测样品中提取的核酸物质为反应模板，以脊髓灰质炎病毒特异性序列为引物，经反转录-PCR反应程序和嵌套PCR反应程序进行聚合酶链式反应扩增，得到PCR产物，经检测，若该PCR产物中有PCR特异性扩增产物，则说明待测样品中含有脊髓灰质炎病毒。本发明不仅具有特异性好、灵敏度高、抗干扰抗杂志能力强等优点，而且还能提供环境介质中脊髓灰质炎病毒潜在的感染效应等信息，为快速检测环境介质中脊髓灰质炎病毒、评估环境中灰质病毒感染风险、预防脊髓灰质疾病爆发提供强有力的技术支持。