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公开(公告)号:CN104212792A
公开(公告)日:2014-12-17
申请号:CN201410162336.8
申请日:2014-04-22
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种基于切刻内切酶的网状滚环扩增体系及其应用,该扩增体系在现有第二代超分支滚环扩增技术的基础上,通过引入一种特殊的核酸内切酶,即切刻内切酶Nb.BsrDI,从而发展出第三代滚环扩增技术,即网状滚环扩增技术(NRCA)。本发明的网状滚环扩增所产生的荧光信号强度随靶标DNA浓度的增加而增加,并且荧光信号强度明显高于线性滚环扩增和超分支滚环扩增,检测限达到0.1fM。该技术与第一代线性滚环扩增和第二代超分支滚环扩增相比,不仅保持了原有技术在操作性、使用成本、扩增所需时间等方面的优势,而且在原有技术基础上进一步实现了信号放大,从而为超低丰度核酸样本的分析检测提供了良好的技术条件,其应用前景非常广阔。