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公开(公告)号：CN115873063A
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN202210831088.6
申请日：2022-07-14
Applicant: 上海医药工业研究院有限公司 , 正大天晴药业集团股份有限公司 , 上海多米瑞生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及重组大肠埃希菌匀浆液的澄清方法，包括在获得含有目的蛋白的匀浆液上清后，在匀浆液上清中加入甲酸铵，第一次离心取上清，获得目的蛋白的甲酸铵处理液；在该甲酸铵处理液中加入聚乙烯亚胺，第二次离心取上清，获得目的蛋白的聚乙烯亚胺处理液。本发明的澄清方法工艺简单、适用性广，采用该方法获得的目的蛋白的处理液澄清透亮，目的蛋白损失低，易于后续进行脱盐、层析、浓缩等进一步纯化。
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公开(公告)号：CN114763542A
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN202210026351.4
申请日：2022-01-11
Applicant: 正大天晴药业集团股份有限公司 , 上海医药工业研究院 , 上海多米瑞生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用酵母胞内表达制备黄曲霉尿酸氧化酶的方法，包括在诱导重组酵母胞内表达黄曲霉尿酸氧化酶后，使菌体置于破胞缓冲液中破碎细胞；其中所述破胞缓冲液包含添加剂，所述添加剂选自二硫代苏糖醇、三(2‑羧乙基)膦、半胱氨酸、谷胱甘肽中的一种或几种的组合。本发明通过优化匀浆缓冲液抑制酵母胞内蛋白的降解，保证了目标蛋白的完整性；还能改善破胞条件如降低匀浆压力，从而降低了生产能耗，降低了对于设备的要求。
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公开(公告)号：CN117586415A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202210993518.4
申请日：2022-08-18
Applicant: 上海多米瑞生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种重组Ulp1融合蛋白酶及其制备方法。具体地，本发明提供了一种重组Ulp1融合蛋白酶，所述融合蛋白酶具有式I所示的结构：(Z1)n‑L1‑Ulp1‑L2‑(Z1)m。本发明应用大肠杆菌表达系统，通过设计表达载体，实现了重组Ulp1融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达。与原始Ulp1蛋白酶相比，本发明所述的重组Ulp1融合蛋白酶具有更好的溶解性和更低的等电点，使得下游分离和纯化工艺更加简单有效，提高了Ulp1的酶活性稳定性和生产工艺收率。酶活性分析结果证明重组表达的S13‑Ulp1或Ulp1‑S13融合蛋白酶具有比原始Ulp1酶更高的催化活性。本发明提供的制备工艺为工业化高效生产Ulp1酶奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110386978A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201810355270.2
申请日：2018-04-19
Applicant: 上海多米瑞生物技术有限公司 , 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明属于生物医药领域，涉及大肠杆菌周质空间表达Fab蛋白的提取方法。所述的提取方法包括：将周质空间表达Fab蛋白的重组大肠杆菌菌体混悬于含有二价阳离盐的酸性缓冲液中，进行低压匀浆处理，之后除掉细胞碎片等杂质即得到含有目的蛋白的周质提取液；由此获得的周质提取液调pH值后进行高温加热处理，去除絮状沉淀后得到大肠杆菌周质空间Fab蛋白粗纯化液。本发明提取方法在尽量保证Fab提取收量的基础上有效地去除了Fab相关杂质，将目的蛋白中Fab纯度提高至90％以上，从而降低后续蛋白质层析纯化的难度以及成本。
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公开(公告)号：CN119912580A
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202311425598.4
申请日：2023-10-31
Applicant: 上海多米瑞生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种融合蛋白、药物组合物及应用。该融合蛋白由尿酸酶与具有黏蛋白结合属性多肽融合而成。本发明的融合蛋白的原有尿酸酶活性不受影响，其与覆盖肠上皮黏液层的Ⅱ型黏蛋白的结合属性显著提高，可用于口服治疗与尿酸量升高相关的疾病或障碍，包括例如高尿酸血症、高尿酸尿症和痛风。
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