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公开(公告)号：CN114807020A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210261966.5
申请日：2022-03-17
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院
Abstract: 本发明公开了提取临床级脂肪全组织细胞外囊泡的方法及应用，本发明脂肪全组织细胞外囊泡的提取过程中，仅需要脂肪组织漂洗、离心保留中间脂肪组织，脂肪组织冰上匀浆、离心的下清液，下清液中脂肪全组织细胞外囊泡提取三个步骤。全程操作简单，纯机械提取操作，无需进行细胞培养或采用药物进行处理，不仅耗时短，而且提取得到的细胞外囊泡几乎不受外界毒性因素影响，安全性高，达到临床级。通过体外体内实验，发现脂肪组织细胞外囊泡具有良好的促进血管生成和皮肤创面愈合的能力。
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公开(公告)号：CN118845837A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411006282.6
申请日：2022-03-17
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院
Abstract: 本发明公开了提取临床级脂肪全组织细胞外囊泡的方法及应用，本发明脂肪全组织细胞外囊泡的提取过程中，仅需要脂肪组织漂洗、离心保留中间脂肪组织，脂肪组织冰上匀浆、离心的下清液，下清液中脂肪全组织细胞外囊泡提取三个步骤。全程操作简单，纯机械提取操作，无需进行细胞培养或采用药物进行处理，不仅耗时短，而且提取得到的细胞外囊泡几乎不受外界毒性因素影响，安全性高，达到临床级。通过体外体内实验，发现脂肪组织细胞外囊泡具有良好的促进血管生成和皮肤创面愈合的能力。
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公开(公告)号：CN114672456B
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202210195340.9
申请日：2022-03-01
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院
IPC: C12N5/0775 , C12N13/00 , A61K35/28 , A61P17/02
Abstract: 本发明公开了利用超声刺激提高脂肪干细胞分泌胞外囊泡效率的方法及应用，包括A、脂肪干细胞提取；B、超声刺激脂肪干细胞：第三代的脂肪干细胞长满以后，PBS洗涤，更换不含血清的低糖DMEM，将一定厚度的耦合剂均匀地涂抹在细胞培养皿下方，然后将超声发生设备的换能器与耦合剂紧密贴合以排除空气，超声的剂量设置为0.5～1.5W/cm2，暴露时间为30～120s；C、提取脂肪干细胞胞外囊泡。经过验证，经超声刺激脂肪干细胞后，其分泌的囊泡数量比未经超声刺激的脂肪干细胞提高60余倍；囊泡所含蛋白量提高3倍余，且高表达囊泡特异标志物，并且在促皮肤创面愈合方面效果显著。
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公开(公告)号：CN114672456A
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN202210195340.9
申请日：2022-03-01
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院
IPC: C12N5/0775 , C12N13/00 , A61K35/28 , A61P17/02
Abstract: 本发明公开了利用超声刺激提高脂肪干细胞分泌胞外囊泡效率的方法及应用，包括A、脂肪干细胞提取；B、超声刺激脂肪干细胞：第三代的脂肪干细胞长满以后，PBS洗涤，更换不含血清的低糖DMEM，将一定厚度的耦合剂均匀地涂抹在细胞培养皿下方，然后将超声发生设备的换能器与耦合剂紧密贴合以排除空气，超声的剂量设置为0.5～1.5W/cm2，暴露时间为30～120s；C、提取脂肪干细胞胞外囊泡。经过验证，经超声刺激脂肪干细胞后，其分泌的囊泡数量比未经超声刺激的脂肪干细胞提高60余倍；囊泡所含蛋白量提高3倍余，且高表达囊泡特异标志物，并且在促皮肤创面愈合方面效果显著。
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公开(公告)号：CN111321111A
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN202010128046.7
申请日：2020-02-23
Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院
Abstract: 本发明公开了一种利用脂肪干细胞胞外囊泡促进皮肤损伤修复的方法，包括细胞提取与鉴定步骤、脂肪干细胞胞外囊泡的提取步骤、脂肪干细胞胞外囊泡的鉴定步骤、皮肤光损伤裸鼠模型的构建和治疗步骤、脂肪干细胞胞外囊泡治疗皮肤光损伤的效果评估步骤、体外皮肤成纤维细胞光损伤模型建立步骤、细胞活力检测步骤、β-半乳糖苷酶染色步骤、小鼠巨噬细胞极化诱导及治疗实验步骤、皮肤成纤维细胞内源性活性氧检测步骤和细胞周期检测步骤。本发明的脂肪干细胞胞外囊泡促进皮肤损伤修复的方法，揭示了脂肪干细胞来源的细胞外囊泡预防皮肤成纤维细胞光损伤的机制，并且验证了其在动物体内的治疗效应。
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