Patent search ap:("上海交通大学医学院附属第九人民医院") AND inv:"单玉飞" Page 1

1.

发明公开
针对人釉原蛋白肽的单克隆抗体的制备方法无效

公开(公告)号：CN108409859A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810191770.7

申请日：2018-03-08

Applicant: 上海交通大学医学院附属第九人民医院

Inventor： 程岚 , 束蓉 , 单玉飞

IPC: C07K16/18 , C12N15/70 , C12N15/12

Abstract: 本发明提供了一种针对人釉原蛋白肽的单克隆抗体的制备方法，包括以下步骤：人工合成全长人釉原蛋白基因hAm，构建含有hAm的重组原核表达质粒pET28a-SUMO-hAm，将重组质粒转化表达菌株E.coli.BL21，诱导表达融合蛋白His-SUMO-rhAm，通过镍柱亲和层析纯化融合蛋白后酶切去除标签得到rhAm。用纯化后rhAm免疫动物6周龄小鼠，筛选出阳性小鼠取脾细胞进行细胞融合，建立杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的筛选及克隆化，最后鉴定单克隆抗体并建立杂交瘤细胞系H10G1。本发明首次从合成人釉原蛋白的编码序列，通过原核表达质粒在大肠杆菌中成功表达的融合蛋白，人工合成的重组人釉原蛋白可以通过镍柱亲和层析纯化，将蛋白免疫小鼠后成功筛选出能生产单克隆抗体的骨髓瘤细胞株，稳定的获得大量单克隆抗体。

Patent Agency Ranking