公开(公告)号：CN112011497A

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN202010883971.0

申请日：2020-08-28

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张凡庆 ,  王凤青 ,  张蕾 ,  闫洁新 ,  程曼玲

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  C07K19/00 ,  C07K16/12 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及分泌表达猪源性抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，属于基因工程技术领域。所述重组乳酸乳球菌携带分泌表达抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的融合序列，所述融合序列具有如SEQ ID No.1所示序列与如SEQ ID No.2所示的单链抗体序列，其中，如SEQ ID No.1所示序列为含有分泌信号肽USP45、分泌增强信号肽LEISSTCDA和硫氧还蛋白基因的序列。获得的分泌的抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛的单链抗体分子量约为45kDa，能特异性的识别产肠毒素大肠杆菌，阻断细菌的感染，以及对仔猪产肠毒素大肠杆菌病提供保护作用。

公开(公告)号：CN112011497B

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202010883971.0

申请日：2020-08-28

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张凡庆 ,  王凤青 ,  张蕾 ,  闫洁新 ,  程曼玲

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  C07K19/00 ,  C07K16/12 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及分泌表达猪源性抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，属于基因工程技术领域。所述重组乳酸乳球菌携带分泌表达抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛单链抗体的融合序列，所述融合序列具有如SEQ ID No.1所示序列与如SEQ ID No.2所示的单链抗体序列，其中，如SEQ ID No.1所示序列为含有分泌信号肽USP45、分泌增强信号肽LEISSTCDA和硫氧还蛋白基因的序列。获得的分泌的抗产肠毒素大肠杆菌K88菌毛的单链抗体分子量约为45kDa，能特异性的识别产肠毒素大肠杆菌，阻断细菌的感染，以及对仔猪产肠毒素大肠杆菌病提供保护作用。

公开(公告)号：CN112080455B

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN202010962886.3

申请日：2020-09-14

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张凡庆 ,  王凤青 ,  张蕾 ,  闫洁新 ,  程曼玲

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/13 ,  C12N15/74 ,  A61K35/744 ,  A61P1/00 ,  C12R1/01

Abstract: 一种表达分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，该重组乳酸乳球菌，其蛋白序列中具有分泌表达抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的融合序列，该融合序列具有SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。重组乳酸乳球菌分泌的单链抗体能够与猪传染性胃肠炎病毒特异性结合，可用于阻断猪传染性胃肠炎病毒的感染，以及对仔猪感染病毒提供保护作用。

公开(公告)号：CN112080455A

公开(公告)日：2020-12-15

申请号：CN202010962886.3

申请日：2020-09-14

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张凡庆 ,  王凤青 ,  张蕾 ,  闫洁新 ,  程曼玲

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/13 ,  C12N15/74 ,  A61K35/744 ,  A61P1/00 ,  C12R1/01

Abstract: 一种表达分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，该重组乳酸乳球菌，其蛋白序列中具有分泌表达抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的融合序列，该融合序列具有SEQ ID No.4所示的氨基酸序列。重组乳酸乳球菌分泌的单链抗体能够与猪传染性胃肠炎病毒特异性结合，可用于阻断猪传染性胃肠炎病毒的感染，以及对仔猪感染病毒提供保护作用。

公开(公告)号：CN111848790B

公开(公告)日：2022-02-22

申请号：CN202010789794.X

申请日：2020-08-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张蕾 ,  王凤青 ,  闫洁新 ,  程曼玲 ,  张凡庆

IPC: C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  A61K39/40 ,  A61P31/04 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了一种牛源抗金黄色葡萄球菌的单链抗体及其制备和应用，涉及单链抗体基因工程领域。该单链抗体至少包括牛抗体轻链可变区(VL)、牛抗体重链可变区(VH)和中间连接肽(Linker)，连接顺序是VL‑Linker‑VH；其制备方法包括获得牛源性单链抗体基因，构建牛源单链抗体初级文库，富集淘选，构建单链抗体原核表达质粒pGEX‑4T‑1‑scFv，获得单链抗体原核表达蛋白；可应用于治疗金黄色葡萄球菌引起的牛乳腺炎。本发明的单链抗体能够特异性的结合金葡菌LukE蛋白，抑制LukED对牛乳腺上皮细胞的膜裂解作用，从而减弱金葡菌对牛乳腺上皮细胞的粘附和损伤，具有一定的抑制金葡菌对乳腺损伤的功能。

公开(公告)号：CN111848790A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010789794.X

申请日：2020-08-07

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 朱建国 ,  张蕾 ,  王凤青 ,  闫洁新 ,  程曼玲 ,  张凡庆

IPC: C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  A61K39/40 ,  A61P31/04 ,  A61P15/00

Abstract: 本发明公开了一种牛源抗金黄色葡萄球菌的单链抗体及其制备和应用，涉及单链抗体基因工程领域。该单链抗体至少包括牛抗体轻链可变区(VL)、牛抗体重链可变区(VH)和中间连接肽(Linker)，连接顺序是VL-Linker-VH；其制备方法包括获得牛源性单链抗体基因，构建牛源单链抗体初级文库，富集淘选，构建单链抗体原核表达质粒pGEX-4T-1-scFv，获得单链抗体原核表达蛋白；可应用于治疗金黄色葡萄球菌引起的牛乳腺炎。本发明的单链抗体能够特异性的结合金葡菌LukE蛋白，抑制LukED对牛乳腺上皮细胞的膜裂解作用，从而减弱金葡菌对牛乳腺上皮细胞的粘附和损伤，具有一定的抑制金葡菌对乳腺损伤的功能。