公开(公告)号：CN102643836A

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201210118389.0

申请日：2012-04-20

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  杨桂华 ,  王晓磊 ,  李善爽 ,  高美凤 ,  高蕾 ,  赵攀峰

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/63 ,  C07K14/08

Abstract: 本发明涉及一种基因工程技术领域的诺如病毒P粒子基因PGENE以及在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子的方法，该基因序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，并添加六个组氨酸(6×his)标签，在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子的方法包括：构建含pET32-PGENE基因的表达载体；转化大肠杆菌；pET32-PGENE活性蛋白的提取。本发明提供的P粒子的免疫原性要强于VLPs，而且P粒子结构稳定，该P粒子作为NVs口服亚基疫苗，在广泛预防Norovirus病毒感染上具有重要应用价值。

公开(公告)号：CN102676546A

公开(公告)日：2012-09-19

申请号：CN201210118900.7

申请日：2012-04-20

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  杨桂华 ,  王晓磊 ,  李善爽 ,  高美凤 ,  高蕾 ,  赵攀峰

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/63 ,  C12N15/82 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种基因工程技术领域的PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法，该基因的碱基序列如SEQIDNO.1所示，该方法包括以下步骤：PGENE基因表达载体的构建；所述包含PGENE基因表达载体的农杆菌转化番茄；转基因番茄外源基因整合和转录后RNA的检测；PGENE功能蛋白的提取。本发明通过构建植物表达载体，在植物中表达PGENE活性蛋白，该蛋白在预防诺如病毒引起的非细菌肠胃炎方面具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN102643827A

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201210103272.5

申请日：2012-04-10

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  王晓磊 ,  李善爽 ,  杨桂华 ,  高美凤

IPC: C12N15/16 ,  C07K14/575 ,  C12N15/63 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法，该基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，该方法包括如下步骤：将含有融合基因4×Tβ4的克隆载体质粒进行酶切，回收目标DNA片段，获得带有相应的粘性末端的目的基因4×Tβ4，然后将其克隆到烟草表达载体中，通过测序或酶切鉴定，在确保表达载体中的目的基因阅读框架正确的前提下，再将表达载体质粒用冻融法导入农杆菌中，获得工程菌；将灭菌后的烟草种子播于发苗培养基上，取生长两周的无菌叶片，作为外植体进行转化；提取4×Tβ4功能蛋白。本发明提供的融合蛋白4×Tβ4在皮肤和眼角膜伤口治愈和修复方面具有重要的生物活性和功能。

公开(公告)号：CN102676546B

公开(公告)日：2013-11-20

申请号：CN201210118900.7

申请日：2012-04-20

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  杨桂华 ,  王晓磊 ,  李善爽 ,  高美凤 ,  高蕾 ,  赵攀峰

IPC: C12N15/40

Abstract: 本发明涉及一种基因工程技术领域的PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法，该基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，该方法包括以下步骤：PGENE基因表达载体的构建；所述包含PGENE基因表达载体的农杆菌转化番茄；转基因番茄外源基因整合和转录后RNA的检测；PGENE功能蛋白的提取。本发明通过构建植物表达载体，在植物中表达PGENE活性蛋白，该蛋白在预防诺如病毒引起的非细菌肠胃炎方面具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN102643827B

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201210103272.5

申请日：2012-04-10

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  王晓磊 ,  李善爽 ,  杨桂华 ,  高美凤

IPC: C12N15/16 ,  C07K14/575 ,  C12N15/63 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法，该基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，该方法包括如下步骤：将含有融合基因4×Tβ4的克隆载体质粒进行酶切，回收目标DNA片段，获得带有相应的粘性末端的目的基因4×Tβ4，然后将其克隆到烟草表达载体中，通过测序或酶切鉴定，在确保表达载体中的目的基因阅读框架正确的前提下，再将表达载体质粒用冻融法导入农杆菌中，获得工程菌；将灭菌后的烟草种子播于发苗培养基上，取生长两周的无菌叶片，作为外植体进行转化；提取4×Tβ4功能蛋白。本发明提供的融合蛋白4×Tβ4在皮肤和眼角膜伤口治愈和修复方面具有重要的生物活性和功能。

公开(公告)号：CN102643826A

公开(公告)日：2012-08-22

申请号：CN201210102816.6

申请日：2012-04-10

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 赵凌侠 ,  王晓磊 ,  杨桂华 ,  李善爽 ,  高美凤 ,  赵攀峰 ,  高蕾

IPC: C12N15/16 ,  C07K14/575 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种胸腺素β4四联体基因及其在大肠杆菌中表达的方法，该基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，该方法包括以下步骤：将含有所述4×Tβ4基因的克隆载体质粒进行酶切，回收所述4×Tβ4基因的DNA片段，获得带有相应粘性末端的所述4×Tβ4基因，然后将所述带有相应粘性末端的4×Tβ4基因克隆到原核表达载体中，通过测序或酶切鉴定确保所述表达载体中的所述4×Tβ4基因阅读框架正确；将所述表达载体用热激法转化大肠杆菌中，获得包含所述4×Tβ4基因表达载体的大肠杆菌工程菌；提取4×Tβ4功能蛋白。本发明提供的4×Tβ4功能蛋白在皮肤和眼角膜伤口治愈和修复方面具有重要的生物活性和功能。