公开(公告)号：CN110408603B

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN201910708729.7

申请日：2019-08-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 刘倩 ,  樊文杰 ,  冯雁 ,  赵娅瑾

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/25 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了脂酰选择性改变的A54145C1突变体及其构建和应用。具体地，本发明提供了A54145起始缩合结构域C1突变体，其催化底物选择性会发生改变。其中，T16A、A350D、A386S突变体的底物催化倾向于短链脂酰底物；A152G、V300L突变体则有偏好长链脂酰底物的趋势。本发明的突变体突破了天然酶的底物多样性催化，从而获得活性、产量提高的抗生素(如达托霉素)，本发明突变体还可以用于制备特定人工酰基底物修饰的新型抗生素。

公开(公告)号：CN111575251A

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN202010479516.4

申请日：2020-05-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 刘倩 ,  刘盼盼 ,  冯雁 ,  樊文杰

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12P21/02 ,  C12Q1/25

Abstract: 本发明提供了一种用于达托霉素生物合成的dptC1突变体的构建。具体地，本发明提供了一种dptC1突变蛋白，所述dptC1突变蛋白基于如SEQ ID NO:2所示的野生型非核糖体肽合成酶NRPS第一个C结构域(dptC1蛋白)中，选自下组的一个或多个氨基酸位点发生突变：第15位谷氨酰胺(Q)、第145位酪氨酸(Y)、第247位精氨酸(R)、第314位苏氨酸(T)和第355位缬氨酸(V)；并且，所述的dptC1突变蛋白具有将癸酰底物催化反应为N-癸酰类化合物的活性。本发明的发明的dptC1突变蛋白能够提高对癸酰底物的催化效率，实现达托霉素高产优产。

公开(公告)号：CN111575251B

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN202010479516.4

申请日：2020-05-29

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 刘倩 ,  刘盼盼 ,  冯雁 ,  樊文杰

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12P21/02 ,  C12Q1/25

Abstract: 本发明提供了一种用于达托霉素生物合成的dptC1突变体的构建。具体地，本发明提供了一种dptC1突变蛋白，所述dptC1突变蛋白基于如SEQ ID NO:2所示的野生型非核糖体肽合成酶NRPS第一个C结构域(dptC1蛋白)中，选自下组的一个或多个氨基酸位点发生突变：第15位谷氨酰胺(Q)、第145位酪氨酸(Y)、第247位精氨酸(R)、第314位苏氨酸(T)和第355位缬氨酸(V)；并且，所述的dptC1突变蛋白具有将癸酰底物催化反应为N‑癸酰类化合物的活性。本发明的发明的dptC1突变蛋白能够提高对癸酰底物的催化效率，实现达托霉素高产优产。

公开(公告)号：CN110408603A

公开(公告)日：2019-11-05

申请号：CN201910708729.7

申请日：2019-08-01

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 刘倩 ,  樊文杰 ,  冯雁 ,  赵娅瑾

IPC: C12N9/00 ,  C12N15/52 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/25 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了脂酰选择性改变的A54145C1突变体及其构建和应用。具体地，本发明提供了A54145起始缩合结构域C1突变体，其催化底物选择性会发生改变。其中，T16A、A350D、A386S突变体的底物催化倾向于短链脂酰底物；A152G、V300L突变体则有偏好长链脂酰底物的趋势。本发明的突变体突破了天然酶的底物多样性催化，从而获得活性、产量提高的抗生素(如达托霉素)，本发明突变体还可以用于制备特定人工酰基底物修饰的新型抗生素。