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公开(公告)号:CN117025571A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310758174.3
申请日:2023-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种低温限制性核酸内切酶突变蛋白及其制备方法与应用,本发明通过广泛而深入的研究,通过对蛋白进行氨基酸单位点突变,首次获得了对于KmAgo酶的活性具有显著改善的突变体蛋白,是基于kurthia massiliensis的常温核酸酶Argonaute(KmAgo,SEQ ID NO.1所示的野生型序列)的突变蛋白或其活性片段、变异形式、衍生蛋白。在果蝇胚胎体内实验中,与野生型相比,本发明突变蛋白的DNA剪切活性是野生型的8倍,并且利用突变体首次在果蝇胚胎中实现了高效的单链DNA剪切,为细胞和组织的多轮基因标记技术提供了重要的方法支持。