公开(公告)号：CN102533833A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201110320694.3

申请日：2011-10-20

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 黄曦 ,  李俊霞 ,  王钱福 ,  殷俊 ,  李明珠 ,  邓子新 ,  张日俊 ,  涂国全

IPC: C12N15/66 ,  C12N9/52

Abstract: 本发明涉及一种链霉菌表达质粒的构建方法及角蛋白酶的生产方法。本发明的链霉菌表达质粒的构建方法，包括如下步骤：选用密苏里游动放线菌木糖异构酶的启动子Xi和阿维链霉菌淀粉酶终止子，启动子-SD序列来自于密苏里游动放线菌木糖异构酶基因的90-269bp；将克隆的sfks基因插入到合成的Xi启动子-SD-amyA2终止子片段中构建表达框结构中，之后采用常规方法构建链霉菌表达质粒。本发明涉及角蛋白酶的生产方法为将链霉菌表达质粒通过接合转移转入表达宿主变铅青链霉菌TK24中，进行重组表达，产生角蛋白酶。本发明构建的表达质粒在变铅青链霉菌TK24中表达后粗酶液的比活为1700U/mg，比出发菌株弗氏链霉菌变种S-221的比活提高50倍，表达后角蛋白酶产量远高于出发菌株。