同时分离肝星状细胞及成纤维母细胞的方法

    公开(公告)号:CN103555656A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310507049.1

    申请日:2013-10-24

    Abstract: 本发明公开了一种同时分离肝星状细胞及成纤维母细胞的方法,其特征是,包括如下步骤:将小鼠麻醉处死后,U型剖开腹腔,经门静脉,以胶原酶、蛋白酶灌注,肝脏变软后剥离肝包膜制成细胞悬液,Nycodenze梯度离心分离;吸取细胞层,加入大鼠抗小鼠THY1抗体,该抗体为0.2-0.25μg/L×106细胞终浓度,4℃孵育25-30min;用PBS buffer洗涤细胞一次,并将细胞浓度定为1-2×106个/ml,然后加入山羊抗大鼠IgG Dynabeads免疫磁珠,混匀后置2-8℃孵育15-20min;将分离柱安装入磁场中1-2min分离出成纤维母细胞;吸取上清混悬后分离出肝星状细胞。

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