公开(公告)号：CN103898158A

公开(公告)日：2014-07-02

申请号：CN201410075547.8

申请日：2014-03-04

Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 ,  上海中医药大学附属市中医医院

Inventor： 李琦 ,  任建琳 ,  季青 ,  刘宣 ,  隋华 ,  周利红 ,  刘宁宁 ,  朱惠蓉 ,  颜琳琳 ,  冯媛媛

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3-Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3-Basic-MALAT1-promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL-SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。

公开(公告)号：CN103898158B

公开(公告)日：2019-10-29

申请号：CN201410075547.8

申请日：2014-03-04

Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 ,  上海中医药大学附属市中医医院

Inventor： 李琦 ,  任建琳 ,  季青 ,  刘宣 ,  隋华 ,  周利红 ,  刘宁宁 ,  朱惠蓉 ,  颜琳琳 ,  冯媛媛

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/02 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地，将MALAT1的启动子序列（1100bp）插入pGL3‑Basic载体，构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3‑Basic‑MALAT1‑promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL‑SV40共转染肿瘤细胞，添加候选抗肿瘤药物作用细胞，然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响，从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选，方法简单，直观和快速，靶向性强，无放射性。