公开(公告)号：CN104911145B

公开(公告)日：2018-11-09

申请号：CN201510270428.2

申请日：2015-05-25

Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院

Inventor： 丁道芳 ,  胡鸿扬 ,  丁立 ,  何杰 ,  杜国庆 ,  郑昱新 ,  詹红生

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明公开了一种高活力原代软骨细胞的制备方法，包括如下步骤：1，取幼鼠四肢关节处软骨组织；2，采用手术专用的刀片进行软骨组织切碎；3，置于恒温摇床中摇动；置于水平离心机中1500‑2000rpm离心，留下细胞沉淀，继续放置摇床中消化，用1ml枪头吹打数次后，软骨细胞从软骨基质上脱离，置于水平离心机中1500‑2000rpm离心，留取软骨细胞沉淀；4，将软骨细胞沉淀种植于培养皿中，培养于含10％FBS的DMEM高糖培养基中，得到高活力原代软骨细胞。与传统的软骨细胞提取方法相比，本发明方法在时间上缩短一半，在软骨细胞的得率上提高至少提高了10倍，且经实验验证所得软骨细胞有良好的增殖率和细胞形态。

公开(公告)号：CN104911145A

公开(公告)日：2015-09-16

申请号：CN201510270428.2

申请日：2015-05-25

Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院

Inventor： 丁道芳 ,  胡鸿扬 ,  丁立 ,  何杰 ,  杜国庆 ,  郑昱新 ,  詹红生

IPC: C12N5/077

Abstract: 本发明公开了一种高活力原代软骨细胞的制备方法，包括如下步骤：1，取幼鼠四肢关节处软骨组织；2，采用手术专用的刀片进行软骨组织切碎；3，置于恒温摇床中摇动；置于水平离心机中1500-2000rpm离心，留下细胞沉淀，继续放置摇床中消化，用1ml枪头吹打数次后，软骨细胞从软骨基质上脱离，置于水平离心机中1500-2000rpm离心，留取软骨细胞沉淀；4，将软骨细胞沉淀种植于培养皿中，培养于含10％FBS的DMEM高糖培养基中，得到高活力原代软骨细胞。与传统的软骨细胞提取方法相比，本发明方法在时间上缩短一半，在软骨细胞的得率上提高至少提高了10倍，且经实验验证所得软骨细胞有良好的增殖率和细胞形态。