公开(公告)号：CN102980969A

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201210492281.8

申请日：2012-11-27

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 吴弢 ,  唐吉鹤 ,  陶宏迅

IPC: G01N30/90

Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶抑制剂的筛选方法，具体涉及一种利用薄层色谱生物自显影技术筛选脂肪酶抑制剂的方法，将供试品溶解于水和/或有机溶剂中，然后将供试品溶液点涂于薄层板上，并将该板放入展开剂中展开、取出、晾干、备用；将上述步骤中得到的薄层板浸渍于底物溶液中，挥干溶剂后再浸渍于脂肪酶溶液中，取出薄层板并置于温度为20℃-40℃条件下进行酶促反应，待反应完全后将薄层板浸渍于显色剂溶液中进行显色反应，得到紫色背景下的白色和/或棕黄色斑点结果图。所述脂肪酶抑制剂的筛选方法不需要复杂的仪器和设备，操作简单，实验耗费低，适合一般实验室操作，而且灵敏度和专属性高于常规筛选方法，筛选结果直观、易于辨识和记忆。

公开(公告)号：CN104880551A

公开(公告)日：2015-09-02

申请号：CN201410073154.3

申请日：2014-02-28

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 吴弢 ,  陶宏迅 ,  周金阁

IPC: G01N33/543 ,  G01N21/33

CPC classification number: G01N33/543 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明公开了一种关于黄嘌呤氧化酶抑制剂及自由基清除剂的高通量筛选方法，所述方法是以黄嘌呤氧化酶-NBT为反应体系，以96孔板为反应载体，以酶标仪为检测器，检测计算待测物在相应浓度下的黄嘌呤氧化酶抑制率/超氧阴离子清除率。本发明提供的关于黄嘌呤氧化酶抑制剂及自由基清除剂的高通量筛选方法，具有反应体积小、可多样本同时检测、操作简单、实验耗费低、灵敏度高等优点，适合高通量筛选，为筛选有效、低毒、价廉的黄嘌呤氧化酶抑制剂及自由基清除剂提供了一种便捷途径和手段，具有显著性进步和实用价值。

公开(公告)号：CN103364519B

公开(公告)日：2015-08-19

申请号：CN201210092278.7

申请日：2012-03-31

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 吴弢 ,  李相坤 ,  唐吉鹤 ,  陶宏迅 ,  孙天杰

IPC: G01N30/90

Abstract: 本发明公开了一种利用薄层色谱与生物自显影技术联用快速筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂或者超氧阴离子清除剂的方法，本发明将薄层色谱和生物活性测定相结合，通过酶促反应产生的超氧阴离子自由基(O2.-)与氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium，NBT)反应产生蓝紫色不溶物甲瓒(formazan)，具有抑制黄嘌呤氧化酶或者清除超氧阴离子的物质抑制了该反应的发生，在薄层板上表现为紫色背景下的黄色和/或白色斑点。本发明适用于分析天然药物和/或中药提取物或者单体化合物对黄嘌呤氧化酶体外抑制活性或者超氧阴离子的清除活性。

公开(公告)号：CN103364519A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201210092278.7

申请日：2012-03-31

Applicant: 上海中医药大学

Inventor： 吴弢 ,  李相坤 ,  唐吉鹤 ,  陶宏迅 ,  孙天杰

IPC: G01N30/90

Abstract: 本发明公开了一种利用薄层色谱与生物自显影技术联用快速筛选黄嘌呤氧化酶抑制剂或者超氧阴离子清除剂的方法，本发明将薄层色谱和生物活性测定相结合，通过酶促反应产生的超氧阴离子自由基(O2.-)与氯化硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium，NBT)反应产生蓝紫色不溶物甲瓒(formazan)，具有抑制黄嘌呤氧化酶或者清除超氧阴离子的物质抑制了该反应的发生，在薄层板上表现为紫色背景下的黄色和/或白色斑点。本发明适用于分析天然药物和/或中药提取物或者单体化合物对黄嘌呤氧化酶体外抑制活性或者超氧阴离子的清除活性。