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公开(公告)号:CN103898137B
公开(公告)日:2019-09-06
申请号:CN201410075529.X
申请日:2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地,根据生物信息学数据库预测has‑mir‑619‑5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点,将其中包含该结合位点的序列扩增出来,插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLO vector,成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具,用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA,以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用,为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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公开(公告)号:CN103898158A
公开(公告)日:2014-07-02
申请号:CN201410075547.8
申请日:2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地,将MALAT1的启动子序列(1100bp)插入pGL3-Basic载体,构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3-Basic-MALAT1-promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL-SV40共转染肿瘤细胞,添加候选抗肿瘤药物作用细胞,然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响,从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选,方法简单,直观和快速,靶向性强,无放射性。
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公开(公告)号:CN103083250A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310022754.2
申请日:2013-01-22
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球及其制备方法,该微球采用水包油型乳化-液中干燥法制备,其油相为聚乳酸-羟基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液,水相为聚乙烯醇的水溶液;微球中丹参酮ⅡA的载药量为1%~10%,包封率为60%~90%,微球粒径范围为30~200mm。本发明提供的丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球,适用于肝癌的介入治疗,具有良好的肝肿瘤末梢血管栓塞作用,有效栓塞时间为7~60天。能够靶向分布在肿瘤组织,缓释药物,提高药物局部浓度,延长药物代谢时间,明显抑制动物肝肿瘤生长,延长动物的生存期。微球栓塞后可抑制人低氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达,减少肿瘤组织微血管密度。
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公开(公告)号:CN103173480A
公开(公告)日:2013-06-26
申请号:CN201310065888.2
申请日:2013-03-01
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明涉及一种质粒载体,所述的质粒载体包含人ABCB1基因的3′UTR序列和双荧光素酶基因。本发明还涉及一种筛选多药耐药相关microRNA的方法,它是将待测试microRNA和如上所述的质粒载体共转染多药耐药宿主细胞,以转染microRNA的多药耐药宿主细胞为对照,观测双荧光素酶活性的变化,确定待测试microRNA是否为多药耐药相关microRNA。本发明还涉及一种microRNA在制备逆转多药耐药的药物中的用途。使用本发明的方法筛选多药耐药相关microRNA具有快速、高效、简单易行的优点,为提高microRNA检测的灵敏度和特异性,以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
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公开(公告)号:CN103083251A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201310022772.0
申请日:2013-01-22
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种丹参酮ⅡA-聚乳酸羟基乙酸微球用于制备抗肿瘤药物的用途,该微球采用水包油型乳化-液中干燥法制备,其油相为聚乳酸-羟基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液,水相为聚乙烯醇的水溶液;微球中丹参酮ⅡA的载药量为1%~10%,包封率为60%~90%,微球粒径范围为30~200mm。本发明提供的丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球,适用于肝癌的介入治疗,具有良好的肝肿瘤末梢血管栓塞作用,有效栓塞时间为7~60天。该微球能够靶向分布在肿瘤组织,缓释药物,提高药物局部浓度,延长药物代谢时间,明显抑制动物肝肿瘤生长,延长动物的生存期。微球栓塞后可抑制人低氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达,减少肿瘤组织微血管密度。
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公开(公告)号:CN103083251B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201310022772.0
申请日:2013-01-22
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种丹参酮ⅡA-聚乳酸羟基乙酸微球用于制备抗肿瘤药物的用途,该微球采用水包油型乳化-液中干燥法制备,其油相为聚乳酸-羟基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液,水相为聚乙烯醇的水溶液;微球中丹参酮ⅡA的载药量为1%~10%,包封率为60%~90%,微球粒径范围为30~200mm。本发明提供的丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球,适用于肝癌的介入治疗,具有良好的肝肿瘤末梢血管栓塞作用,有效栓塞时间为7~60天。该微球能够靶向分布在肿瘤组织,缓释药物,提高药物局部浓度,延长药物代谢时间,明显抑制动物肝肿瘤生长,延长动物的生存期。微球栓塞后可抑制人低氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达,减少肿瘤组织微血管密度。
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公开(公告)号:CN103173481A
公开(公告)日:2013-06-26
申请号:CN201310065889.7
申请日:2013-03-01
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种质粒载体,所述的质粒载体是在pmirGLODual-Luciferase-promoter质粒载体的第6832-7349bp区段内插入了人ABCB1基因的3′UTR序列。本发明还涉及含有上述载体的宿主细胞、上述载体的构建方法及其在筛选多药耐药相关microRNA中的用途。本发明为准确预测调控人ABCB1基因表达的microRNA提供了一种快速、高效、简单易行的方法,进而为提高microRNA检测的灵敏度和特异性,以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
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公开(公告)号:CN103898158B
公开(公告)日:2019-10-29
申请号:CN201410075547.8
申请日:2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属市中医医院
IPC: C12N15/85 , C12N15/66 , C12Q1/6886 , C12Q1/02 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1启动子序列和报告基因的载体及其构建方法和用途。具体地,将MALAT1的启动子序列(1100bp)插入pGL3‑Basic载体,构建获得含MALAT1启动子和报告基因luc+的重组质粒pGL3‑Basic‑MALAT1‑promoter。该重组质粒与海肾萤光素酶报告基因载体pRL‑SV40共转染肿瘤细胞,添加候选抗肿瘤药物作用细胞,然后通过检测双荧光素酶活性可以反映各药物对MALAT1基因启动子转录活性的影响,从而应用于靶向MALAT1基因的抗肿瘤药物筛选。该方法特别适合大规模针对MALAT1基因的抗肿瘤药物的筛选,方法简单,直观和快速,靶向性强,无放射性。
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公开(公告)号:CN103898137A
公开(公告)日:2014-07-02
申请号:CN201410075529.X
申请日:2014-03-04
Applicant: 上海中医药大学附属市中医医院 , 上海中医药大学附属曙光医院
Abstract: 本发明涉及一种含有MALAT1基因3’UTR序列和双荧光素酶报告基因的质粒及其应用。具体地,根据生物信息学数据库预测has-mir-619-5p与MALAT1基因3’UTR区结合的位点,将其中包含该结合位点的序列扩增出来,插入双荧光素酶报告基因质粒pmirGLOvector,成功构建了MALAT1基因3’UTR区双荧光素酶报告基因质粒。该质粒可作为简单易行的工具,用于检测调控MALAT1表达的microRNA的表达量、筛选调控MALAT1表达的microRNA,以及评估microRNA对MALAT1表达的调控作用,为通过检测microRNA表达情况了解肿瘤的发生发展提供了重要手段。
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公开(公告)号:CN103083250B
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201310022754.2
申请日:2013-01-22
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球及其制备方法,该微球采用水包油型乳化-液中干燥法制备,其油相为聚乳酸-羟基乙酸共聚物的二氯甲烷溶液,水相为聚乙烯醇的水溶液;微球中丹参酮ⅡA的载药量为1%~10%,包封率为60%~90%,微球粒径范围为30~200mm。本发明提供的丹参酮ⅡA-聚乳酸/羟基乙酸微球,适用于肝癌的介入治疗,具有良好的肝肿瘤末梢血管栓塞作用,有效栓塞时间为7~60天。能够靶向分布在肿瘤组织,缓释药物,提高药物局部浓度,延长药物代谢时间,明显抑制动物肝肿瘤生长,延长动物的生存期。微球栓塞后可抑制人低氧诱导因子1α和血管内皮生长因子的表达,减少肿瘤组织微血管密度。
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