公开(公告)号：CN108690814A

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201810507747.4

申请日：2018-05-24

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  许鹏飞 ,  刘云 ,  郭金玲 ,  吕育财 ,  雷生娇 ,  田毅红

IPC: C12N1/16 ,  C12N15/01 ,  C12N13/00 ,  C11B1/02 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12R1/645 ,  C11B1/025 ,  C12N13/00 ,  C12N15/01

Abstract: 本发明提供一种快速高效选育产油脂菌株的方法。先利用常压室温等离子体诱变仪对皮状丝孢酵母进行诱变处理，然后接种到含有芝麻酚的平板培养基上，挑选生长旺盛的菌株接种到48孔液体培养基中，并利用96孔板尼罗红荧光染色对培养菌种进行高通量筛选获得增殖快且油脂产量高的突变菌株，最后利用气相色谱检测油脂成分。经过诱变和筛选，选育出一株高产油脂菌株A1，较原始菌株的生物量、油脂产量、油脂产率分别提高了41.6%、120.3%、58.8%；通过气相色谱成分分析其脂肪酸组成与原始菌株相同，为棕榈酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等。将ARTP等离子体诱变技术和苹果酸酶抑制剂、尼罗红荧光染色有机结合，实现高通量筛选，并成功选育出一株油脂高产菌株。

公开(公告)号：CN107446964A

公开(公告)日：2017-12-08

申请号：CN201710823758.9

申请日：2017-09-13

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  许鹏飞 ,  田毅红 ,  郭金玲 ,  吕育财

IPC: C12P7/64 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种利用甾体化合物提高皮状丝孢酵母微生物油脂合成产量的方法，包括种子液培养，具体采用接种环从皮状丝孢酵母菌种中蘸取菌液接种到斜面上培养，从活化的斜面上挑取一个菌落接种到种子液培养基中培养；再将种子液接种至含甾体类化合物的发酵培养基中培养，离心集菌，放入烘箱烘干，干菌体加入盐酸，静置沸水浴，迅速冷却到常温后加入2倍体积的氯仿-甲醇溶液，混合均匀后室温静置、离心，萃取得氯仿层，上层溶液再加氯仿，振荡均匀，离心，进行二次萃取得氯仿层，合并氯仿，旋转蒸发除去氯仿得油脂。添加甾体类化合物对皮状丝孢酵母中生物油脂种类没有影响，和菜籽油等植物油成分相似，油脂脂肪酸中油酸、亚油酸分别增加21.6%、32.3%。

公开(公告)号：CN107446964B

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN201710823758.9

申请日：2017-09-13

Applicant: 三峡大学

Inventor： 龚大春 ,  许鹏飞 ,  田毅红 ,  郭金玲 ,  吕育财

IPC: C12P7/64 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种利用甾体化合物提高皮状丝孢酵母微生物油脂合成产量的方法，包括种子液培养，具体采用接种环从皮状丝孢酵母菌种中蘸取菌液接种到斜面上培养，从活化的斜面上挑取一个菌落接种到种子液培养基中培养；再将种子液接种至含甾体类化合物的发酵培养基中培养，离心集菌，放入烘箱烘干，干菌体加入盐酸，静置沸水浴，迅速冷却到常温后加入2倍体积的氯仿‑甲醇溶液，混合均匀后室温静置、离心，萃取得氯仿层，上层溶液再加氯仿，振荡均匀，离心，进行二次萃取得氯仿层，合并氯仿，旋转蒸发除去氯仿得油脂。添加甾体类化合物对皮状丝孢酵母中生物油脂种类没有影响，和菜籽油等植物油成分相似，油脂脂肪酸中油酸、亚油酸分别增加21.6%、32.3%。