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公开(公告)号：CN101240284B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN200710053340.0
申请日：2007-09-20
Applicant: 三峡大学
Abstract: 一种葡萄球菌激酶及利用生物技术高效分泌表达重组葡萄球菌激酶的方法。它以金黄色葡萄球菌的总DNA为摸板，通过PCR扩增，获得含信号肽的葡激酶(Sak)基因。该基因序列第33、34及36位氨基酸，不同于已报道的Sak基因。将该基因与载体pGEX-4T-1进行连接，转化宿主菌，获得的重组工程菌，经TPTG诱导可分泌表达具有纤溶酶原激活作用的重组葡激酶。采用本发明方法表达重组葡激酶蛋白，基因表达水平高，表达产物主要为分泌型蛋白，并以活性状态存在于菌体外胞质及胞外，因此，纯化工艺简单，产量高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN101885784A
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN201010231540.2
申请日：2010-07-20
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明提供了一种用液体培养法产葡甘聚糖的方法，对影响魔芋细胞液体培养产次生代谢物葡甘聚糖产生的几种主要因子进行了研究，结果表明，在魔芋细胞液体培养生产葡甘聚糖的过程中，MS培养基为最适培养基，第15天左右葡甘聚糖的含量达到最大值，pH为6.0时利于葡甘聚糖的合成，25g/L的乳糖为最适碳源，2，4-D在1.0mg/L时葡甘聚糖的积累效果明显，其它浓度的2，4-D和NAA对葡甘聚糖积累效果不明显，细胞分裂素6-BA使葡甘聚糖积累明显高于KT，且1.5mg/L时葡甘聚糖积累量最高。最后得到MS+2，4-D(1.0mg/L)+6-BA(1.5mg/L)+乳糖(25mg/L)为魔芋细胞培养生产葡甘聚糖的较优培养基，其最高葡甘聚糖积累量可达125.70mg/100mL。
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公开(公告)号：CN101027974A
公开(公告)日：2007-09-05
申请号：CN200710065292.7
申请日：2007-04-10
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明公开了香果树的一种体外培养方法。该培养方法包括以下步骤：1)胚性愈伤组织的诱导：以经灭菌的种子为外植体，将其置于胚性愈伤组织诱导培养基上诱导胚性愈伤组织；所述胚性愈伤组织诱导培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6－苄基腺嘌呤和2，4－D；2)体细胞胚的分化：将胚性愈伤组织置于分化培养基上诱导分化；所述分化培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6－苄基腺嘌呤和α－萘乙酸；3)生根和植株再生：将分化出的子叶胚置于生根培养基上诱导生根，得到香果树再生植株；所述生根培养基为1/4－3/4MS培养基。本发明为扩大香果树的繁殖系数、该物种的种质保存及其遗传转化奠定了良好的基础，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101240284A
公开(公告)日：2008-08-13
申请号：CN200710053340.0
申请日：2007-09-20
Applicant: 三峡大学
Abstract: 一种葡萄球菌激酶及利用生物技术高效分泌表达重组葡萄球菌激酶的方法。它以金黄色葡萄球菌的总DNA为模板，通过PCR扩增，获得含信号肽的葡激酶(Sak)基因。该基因序列第33、34及36位氨基酸，不同于已报道的Sak基因。将该基因与载体pGEX－4T－1进行连接，转化宿主菌，获得的重组工程菌，经IPTG诱导可分泌表达具有纤溶酶原激活作用的重组葡激酶。采用本发明方法表达重组葡激酶蛋白，基因表达水平高，表达产物主要为分泌型蛋白，并以活性状态存在于菌体外胞质及胞外，因此，纯化工艺简单，产量高，生产成本低。
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公开(公告)号：CN101024820A
公开(公告)日：2007-08-29
申请号：CN200710051497.X
申请日：2007-02-07
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明公开了一种建立花生转基因受体体系的方法及应用。以花生幼叶为外植体接种在附加不同激素组合的诱导培养基上，诱导幼叶产生胚性愈伤组织，进而在附加不同激素组合的分化培养上分化培养，产生丛生芽或丛生芽组织块，最后转接到附加不同激素组合的生根培养基上生根培养，获得再生植株。选取继代培养后处于旺盛生长期的胚性愈伤组织块和丛生芽组织块作为受体，采用农杆菌介导法将外源基因导入受体细胞，经过恢复、筛选、分化、生根等步骤获得转基因植株。本发明能从绝大多数基因型的受体细胞中再生出转基因植株，且转化频率高，再生植株性状变异小。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101885784B
公开(公告)日：2012-08-08
申请号：CN201010231540.2
申请日：2010-07-20
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明提供了一种用液体培养法产葡甘聚糖的方法，对影响魔芋细胞液体培养产次生代谢物葡甘聚糖产生的几种主要因子进行了研究，结果表明，在魔芋细胞液体培养生产葡甘聚糖的过程中，MS培养基为最适培养基，第15天左右葡甘聚糖的含量达到最大值，pH为6.0时利于葡甘聚糖的合成，25g/L的乳糖为最适碳源，2，4-D在1.0mg/L时葡甘聚糖的积累效果明显，其它浓度的2，4-D和NAA对葡甘聚糖积累效果不明显，细胞分裂素6-BA使葡甘聚糖积累明显高于KT，且1.5mg/L时葡甘聚糖积累量最高。最后得到MS+2，4-D(1.0mg/L)+6-BA(1.5mg/L)+乳糖(25mg/L)为魔芋细胞培养生产葡甘聚糖的较优培养基，其最高葡甘聚糖积累量可达125.70mg/100mL。
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公开(公告)号：CN100556283C
公开(公告)日：2009-11-04
申请号：CN200710065292.7
申请日：2007-04-10
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明公开了香果树的一种体外培养方法。该培养方法包括以下步骤：1)胚性愈伤组织的诱导：以经灭菌的种子为外植体，将其置于胚性愈伤组织诱导培养基上诱导胚性愈伤组织；所述胚性愈伤组织诱导培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6-苄基腺嘌呤和2，4-D；2)体细胞胚的分化：将胚性愈伤组织置于分化培养基上诱导分化；所述分化培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6-苄基腺嘌呤和α-萘乙酸；3)生根和植株再生：将分化出的子叶胚置于生根培养基上诱导生根，得到香果树再生植株；所述生根培养基为1/4-3/4MS培养基。本发明为扩大香果树的繁殖系数、该物种的种质保存及其遗传转化奠定了良好的基础，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN100556282C
公开(公告)日：2009-11-04
申请号：CN200710065291.2
申请日：2007-04-10
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明公开了银鹊树的一种体外培养方法。该培养方法包括以下步骤：1)胚性愈伤组织的诱导：以无菌的未成熟胚为外植体，将其置于胚性愈伤组织诱导培养基上诱导胚性愈伤组织；所述胚性愈伤组织诱导培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4-D和活性炭；2)体细胞胚的分化：将胚性愈伤组织置于分化培养基上诱导分化；所述分化培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6-苄基腺嘌呤和α-萘乙酸；3)生根和植株再生：将分化出的子叶胚置于MS基本培养基上进行生根培养，得到银鹊树再生植株。本发明为扩大银鹊树的繁殖系数、该物种的种质保存及其遗传转化奠定了良好的基础，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN101027973A
公开(公告)日：2007-09-05
申请号：CN200710065291.2
申请日：2007-04-10
Applicant: 三峡大学
Abstract: 本发明公开了银鹊树的一种体外培养方法。该培养方法包括以下步骤：1)胚性愈伤组织的诱导：以无菌的未成熟胚为外植体，将其置于胚性愈伤组织诱导培养基上诱导胚性愈伤组织；所述胚性愈伤组织诱导培养基是在MS基本培养基的基础上添加了2，4－D和活性炭；2)体细胞胚的分化：将胚性愈伤组织置于分化培养基上诱导分化；所述分化培养基是在MS基本培养基的基础上添加了6－苄基腺嘌呤和α－萘乙酸；3)生根和植株再生：将分化出的子叶胚置于MS基本培养基上进行生根培养，得到银鹊树再生植株。本发明为扩大银鹊树的繁殖系数、该物种的种质保存及其遗传转化奠定了良好的基础，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN1657630A
公开(公告)日：2005-08-24
申请号：CN200510059304.6
申请日：2005-03-25
Abstract: 本发明公开了一种以甘露糖作为筛选标记的转基因黄瓜的构建方法。该构建方法是利用植物表达载体将6－磷酸甘露糖异构酶基因导入黄瓜的外植体，经在含甘露糖的培养基上筛选和分化，得到转基因植株。使用甘露糖选择标记系统时，非转化细胞处于饥饿状态，而并非被杀死，所以选择培养过程中较少出现坏死组织，更有利于转基因组织的生长和再生。该选择标记系统具有产物安全、选择剂价格低廉、选择程序简单，而且不影响转化植物的代谢平衡，转基因植株生长旺盛，筛选效果显著等优点，在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用前景，有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。本发明为利用黄瓜作为植物生物反应器表达口服疫苗等提供了良好的技术平台。
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