一种多亚型禽流感病毒混合感染中单一病毒纯化的方法

    公开(公告)号:CN118931849A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202411357929.X

    申请日:2024-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种多亚型禽流感病毒混合感染中单一病毒纯化的方法:(1)采用亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备单克隆抗体腹水;(2)制备混合样品;(3)用HI测定单克隆抗体腹水的效价,对单克隆抗体腹水做稀释;(4)将2倍倍比稀释后所得单克隆抗体腹水与待测样混合,震荡混匀使待测样与不同稀释度的单克隆抗体中和反应;(5)用终点稀释法中和反应后所得反应液进行稀释、纯化,即得。本发明方法使单抗和病毒相对定量中和,尽量减少单抗和病毒用量,中和反应更加灵敏和准确,节约成本和纯化时间,保持了病毒原有生物特性,通过本发明纯化后得到的病毒进行检测鉴定,鉴定结果的准确性确实较单因子血清方法高。

    一种鸡细小病毒VP2单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN117304309A

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202311272433.8

    申请日:2023-09-28

    Abstract: 本发明提供了一种鸡细小病毒VP2单克隆抗体及其应用,涉及到生物技术和病毒学领域,本发明筛选得到的1株鸡细小病毒VP2蛋白单抗,能够特异性结合鸡细小病毒和体外表达的VP2蛋白,且1株单抗的轻链为kappa链,重链为IgG2a。由单抗3F8为包被抗体建立了ChPV VP2蛋白的双抗体夹心ELISA检测平台,对鸡细小病毒的最低检测线达15.6ng/mL,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并与巢式PCR共同对192份临床样品的平行检测显示总符合率达到81.3%。本发明提供的鸡细小病毒的单抗不仅可以用于制备鸡细小病毒相关的检测试剂,还可以为鸡细小病毒VP2蛋白的功能等基础研究提供了原料,有助于养鸡业中对鸡细小病毒的防控工作,也有助于对鸡细小病毒相关蛋白的基础研究。

    一种鸡细小病毒的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN117285619A

    公开(公告)日:2023-12-26

    申请号:CN202311271713.7

    申请日:2023-09-28

    Abstract: 本发明提供了一种鸡细小病毒的单克隆抗体及其应用,涉及到生物技术和病毒学领域,本发明筛选得到的2株鸡细小病毒NS1蛋白单抗,能够特异性结合鸡细小病毒和体外表达的NS1蛋白,且2株单抗的轻链均为kappa链,重链均为IgG1。由单抗1B12为包被抗体建立了ChPVNS1蛋白的双抗体夹心ELISA检测平台,对鸡细小病毒的最低检测线达31.2ng/mL,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并与巢式PCR共同对192份临床样品的平行检测显示总符合率达到89.1%。本发明提供的鸡细小病毒的单抗不仅可以用于制备鸡细小病毒相关的检测试剂,还可以为鸡细小病毒NS1蛋白的功能等基础研究提供了原料,有助于养鸡业中对鸡细小病毒的防控工作,也有助于对鸡细小病毒相关蛋白的基础研究。

    一种检测IBRV和BVDV的引物、探针及方法

    公开(公告)号:CN110157836B

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN201810301912.0

    申请日:2018-04-04

    Abstract: BVDV感染牛提供了一种更好的方法。本发明提供了一种检测IBRV和BVDV的引物、探针及方法。本发明提供的引物和/或探针组合物包括序列表中SEQ ID№:1‐SEQ ID№:6所示至少一种核苷酸序列。本发明利用本发明提供的引物和/或探针组合物,通过包括Taqman二重荧光定量PCR反应的PCR反应,实现了牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的同时检测。本发明提供的引物和/或探针组合物及检测方法,灵敏度高,每个反应最低能检测到100个混合模板拷贝,特异性高、重复性好、干扰性(56)对比文件范晴等.牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立.《中国兽医学报》.2011,第31卷(第10期),摘要,表1,第1.1、1.3节.范晴等.牛病毒性腹泻病毒和牛轮状病毒TaqMan二重实时荧光RT-PCR检测方法的建立.《中国兽医学报》.2011,(第10期),摘要,参见第1.1、1.3节,表1.宋爽等.牛病毒性腹泻病毒、牛传染性支气管炎病毒和口蹄疫病毒多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立《.中国预防兽医学报》.2017,第39卷(第02期),摘要,第1-3节,表1.Hou P等.Detection of bovine viraldiarrhea virus genotype 1 in aerosol by areal time RT-PCR assay《. BMC Vet Res》.2020,第16卷(第1期),张贵刚等.牛病毒性腹泻病毒和牛传染性鼻气管炎病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立.《中国预防兽医学报》.2018,(第10期),54-57+71.季新成.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒分子生物学检测技术研究《.中国博士学位论文全文数据库农业科技辑》.2010,(第10期),曲光刚等.IBRV gB基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立《.中国兽医学报》.2012,(第12期),43-47.谢志勤等.牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立.《动物医学进展》.2019,第40卷(第3期),季新成等.牛传染性鼻气管炎病毒内标荧光定量PCR检测方法的建立与应用《.中国兽医学报》.2010,(第06期),32-37+41.Fan Q等.Development of a GeXP-multiplex PCR assay for the simultaneousdetection and differentiation of sixcattle viruses《.PLoS One》.2017,第12卷(第2期),

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