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公开(公告)号:CN112175918B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202011118840.X
申请日:2020-10-19
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体St‑2‑2△C10及其应用。本发明提供一种7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α‑羟基类固醇脱氢酶的C‑端截短10个氨基酸所得。该突变体具有底物选择性,能够专一性催化CDCA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物,对于CA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物没有催化活性,可用于从复杂底物鸡胆粉中高效合成TUDCA,而不产生有毒物质即副产物TUCA,在特异性生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN115125137A
公开(公告)日:2022-09-30
申请号:CN202210858125.2
申请日:2022-07-20
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明公开了一种结直肠癌实体瘤原代细胞的培养装置及系统,包括培养箱,所述培养箱内设有培养腔,所述培养腔出口处设有可开合且用于密封的箱门,培养腔内设有多个用于培养皿放置且可选择性在水平方向来回转动的放置板,其中,转动的放置板带动培养皿晃动,静置的放置板使培养皿静置。放置板的设计,改变了传统培养箱只能将培养皿进行静置培养,能实现根据用户的需求,进行选择培养皿是在培养箱内培养时进行同步晃动的方式,还是选择选择静置培养方式,更加的符合用户的需求。
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公开(公告)号:CN111849951B
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202010324327.X
申请日:2020-04-22
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及苏氨酸醛缩酶,具体涉及一种L‑苏氨酸醛缩酶突变体R318M及其应用。所述L‑苏氨酸醛缩酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的L‑苏氨酸醛缩酶的第318位氨基酸由Arg变为Met所得。该突变体在催化3,4‑二羟基苯甲醛和甘氨酸合成屈昔多巴[L‑苏式‑(3,4‑二羟基)苯基丝氨酸]的反应中具有77.1%的非对映选择性(de),是野生型的2.5倍多,在生物合成屈昔多巴的工业生产中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN113430183B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202110936737.4
申请日:2021-08-16
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶St‑2‑2的突变体T15G、T15S和T15A。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2,3或4所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第15位氨基酸由Thr定点突变为Gly、Ser或Ala所得。所述突变体在相同底物TCDCA和NADP+的存在下,酶活分别是野生型的3.18、4.27、7.85倍,在生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN111254126B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202010224918.X
申请日:2020-03-26
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α‑羟基类固醇脱氢酶(St‑2‑2)突变体。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2,3,4,5,6,7,8,9或10所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第255位氨基酸由Ile变为Tyr、Gln、Leu、Thr、Gly、Asn、Ser、Ala或Phe所得。所述突变体在相同底物TCDCA和NADP+的存在下,酶活分别是野生型的1.49、1.78、1.79、1.79、1.93、2.44、2.58、2.97、3.34倍,在生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN112251418A
公开(公告)日:2021-01-22
申请号:CN202011120303.9
申请日:2020-10-19
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种专一性催化CDCA及其缀合物的酶及其应用。本发明提供一种7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是由氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的7α‑羟基类固醇脱氢酶的C‑端截短8个氨基酸所得。该突变体具有底物选择性,能够专一性催化CDCA及其牛磺酸或甘氨酸缀合物,可用于血清中总CDCA的检测,在肝胆疾病的临床诊断和预后中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN107841489B
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201711123463.7
申请日:2017-11-14
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种撒丁岛梭菌7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体K179M,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是核酸序列为SEQ ID NO:1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第179位氨基酸由赖氨酸变为甲硫氨酸所得。该突变体对TCDCA的催化比活力是野生型的2.9倍。本发明的K179M突变体在生物转化TCDCA获得TUDCA的工业生产过程中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN110358744A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910638116.0
申请日:2019-07-15
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及7α-羟基类固醇脱氢酶及其编码基因与应用,属于生物技术领域。所述7α-羟基类固醇脱氢酶,为SEQ ID NO.1所示的蛋白,或将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加所获得的功能相同的蛋白。所述7α-羟基类固醇脱氢酶能够催化牛磺胆酸、甘氨胆酸、牛磺鹅去氧胆酸和甘氨鹅去氧胆酸的C7α-羟基的羰基不对称还原反应,催化苯甲酰甲酸乙酯的苯甲酰基中羰基与羟基的不对称还原反应。与撒丁岛梭菌中的7α-羟基类固醇脱氢酶相比,具有更高的催化活性和热稳定性,具有很大的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN106282138B
公开(公告)日:2019-10-08
申请号:CN201610844106.9
申请日:2016-09-22
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种撒丁岛梭菌7α‑羟基类固醇脱氢酶突变体T145S,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α‑羟基类固醇脱氢酶的第145位氨基酸由Thr变为Ser所得。该突变体对底物TCDCA和NADP+的催化效率是野生型的4.85倍,在生物转化CDCA/TCDCA获取UDCA/TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN107058250B
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201710008588.9
申请日:2017-01-05
Applicant: 重庆大学
Abstract: 本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及一种7β‑羟基类固醇脱氢酶基因Y1‑b‑1。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码一种7β‑羟基类固醇脱氢酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,能够催化熊去氧胆酸(UDCA)、牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)的7位羟基的差向异构,使其生成鹅去氧胆酸(CDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)的中间体7‑酮石胆酸(7K‑LCA)、牛磺7‑酮石胆酸(T7K‑LCA),对UDCA、TUDCA的比活力与现有的撒丁岛梭菌7β‑HSDH相当,但具有更好的热稳定性,具有很大的工业应用前景。
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