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公开(公告)号：CN108103122B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201810102026.5
申请日：2018-02-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种添加苯丙氨酸提高食药用真菌胞外多糖产量的方法，属于微生物发酵领域。本发明方法为在食药用真菌液体发酵培养过程中外源添加一定量的苯丙氨酸，提高食药用真菌胞外多糖产量40％，且可以高效、稳定地合成食药用真菌多糖，为提高食药用真菌多糖的研究提供了新的方向，也更利于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN104561081B
公开(公告)日：2019-03-15
申请号：CN201510005585.0
申请日：2015-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Candida amazonensis的表达系统，包括一种新型表达载体，其为环状，从5’‑3’依次可操作性地连接有以下元件：pMD19‑Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。所述能够利用木糖的酵母为Candida amazonensis。本发明的表达载体可实现在Candida amazonensis中的整合型稳定表达，对木糖利用酵母Candida amazonensis的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN108384820A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810102504.2
申请日：2018-02-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种添加酪氨酸提高食药用真菌胞外多糖产量的方法，属于微生物发酵领域。本发明方法为在食药用真菌液体发酵培养过程中外源添加一定量的酪氨酸，提高食药用真菌胞外多糖产量25％，且可以高效、稳定地合成食药用真菌多糖，为提高食药用真菌多糖的研究提供了新的方向，也更利于工业化生产应用。
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公开(公告)号：CN107287144A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710591287.3
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢改造的枯草芽孢杆菌生物转化细胞，所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞的制备方法为：首先经过重组过表达获得一种L-谷氨酸氧化酶，然后再对枯草芽孢杆菌内源谷氨酸分解途径进行代谢工程改造，最后改造了枯草芽孢杆菌对谷氨酸转运途径，制得所述枯草芽孢杆菌生物转化细胞，即重组枯草芽孢杆菌。本发明为参与细胞内源代谢的全细胞转化系统的构建及改良提供了实验依据，为利用枯草芽孢杆菌全细胞高效转化L-谷氨酸生产α-酮戊二酸提供借鉴。
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公开(公告)号：CN104651391A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510078380.5
申请日：2015-02-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 干酪乳杆菌磷脂酶A2基因的重组表达方法，依次包括基因信号肽预测、重组载体的构建﹑转化与筛选﹑表达产物的检测，重组菌产酶发酵；首先根据干酪乳杆菌磷脂酶A2基因序列，signalP进行基因信号肽预测，利用特异性引物在成熟肽两端引入限制性酶切位点，将其亚克隆到载体pKLAC1中，得到表达载体pKLAC1-pla2；然后筛选重组乳酸克鲁维酵母菌株实现重组磷脂酶A2的表达；接着收集发酵上清液，卵黄平板初步检测酶活；最后对酵母进行摇瓶发酵培养。本发明根据克隆到的干酪乳杆菌磷脂酶A2基因，构建真核表达载体，利用酵母表达系统表达了干酪乳杆菌磷脂酶A2基因，并研究了不同发酵条件对重组菌株生长及产酶影响。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104357334A
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201410577583.4
申请日：2014-10-24
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N1/14
Abstract: 一种能够提高非酶糖基化反应抑制率的蜜环菌发酵液的制备方法，包括以下步骤：(1)斜面培养；(2)种子液的培养；(3)将蜜环菌种子液以4％的接种量接种到发酵培养基中，在28～32℃、摇床转速150转/分钟的条件下发酵培养2～4天；(4)调整摇床的温度，在22～25℃、摇床转速150转/分钟的条件下，继续发酵培养3～5天。本发明显著提升了蜜环菌发酵液对非酶糖基化反应的抑制率，为提高其他微生物发酵液的生物活性提供了一种新的方法，同时也为蜜环菌在发酵工业上的应用开发出一种新方向。
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公开(公告)号：CN103773792A
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201410039809.5
申请日：2014-01-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种鼠灰链霉菌AMP脱氨酶基因的原核表达方法，该方法以鼠灰链霉菌基因组为模板，设计特异性引物扩增AMP脱氨酶基因序列，并在其两端加入酶切位点，亚克隆至表达载体构建重组质粒，再将该重组质粒转化大肠杆菌感受态，最后IPTG诱导表达，纯化，得AMP脱氨酶表达终产物。本发明首次在大肠杆菌中成功表达了鼠灰链霉菌来源的AMP脱氨酶，实验结果显示该重组酶具有较高的酶活，且酶活性稳定，易于纯化，可应用于食品、医药领域，为AMP脱氨酶的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103757035A
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201410040528.1
申请日：2014-01-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种鼠灰链霉菌AMP脱氨酶基因的乳酸克鲁维酵母真核表达方法。该方法以鼠灰链霉菌基因组为模板，设计特异性引物扩增AMP脱氨酶基因序列，在其两端分别引入酶切位点，并亚克隆入表达载体pKLAC1构建得到重组质粒，酶切线性化后电转化乳酸克鲁维酵母，筛选阳性克隆转化子，再利用pKLAC1通用引物筛选出多拷贝转化子，最后经种子培养和液体发酵培养，取发酵液上清，即得AMP脱氨酶表达产物。本发明首次在乳酸克鲁维酵母中成功表达了鼠灰链霉菌来源的AMP脱氨酶，实验结显示该重组酶具有较高的酶活，且酶活性稳定，可应用于食品、医药等领域。
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公开(公告)号：CN102286386B
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201110232740.4
申请日：2011-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株东方伊萨酵母及其全细胞转化产胞二磷胆碱的方法，属于生物制药技术领域。本发明利用东方伊萨酵母(Issatchenkiaorientalis)Z1，即CCTCC NO：M2011272，全细胞制备胞二磷胆碱，以磷酸胆碱和5’-胞苷酸为底物，以葡萄糖为能量供体，通过添加无机离子提高ATP再生效率；以葡萄糖为能量供体，一方面提供菌体的能量需求，另一方面为胞二磷胆碱合成酶系提供ATP；通过添加钾离子、镁离子和锰离子中的一种或组合改变代谢流向，提高ATP的再生速率，从而与胞二磷胆碱酶系速率相匹配，实现高效制备胞二磷胆碱；使用酵母全细胞，并在制备过程的水溶液中添加甲苯来提高细胞的透性，以提高胞二磷胆碱合成酶系的速率。
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