公开(公告)号：CN113337487A

公开(公告)日：2021-09-03

申请号：CN202110181154.5

申请日：2021-02-09

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 聂俊伟 ,  瞿志鹏 ,  邱翠 ,  刘欣 ,  曹林

IPC: C12N9/12 ,  C12N9/16 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明提供了一种用于核酸片段化的酶组合物及其应用，所述酶组合物包括用于片段化核酸的核酸内切酶和用于修复粘性末端的DNA聚合酶，还包括用于消化原始样本或反应过程中产生的单链，核酸内切酶、DNA聚合酶和核酸外切酶集中在一个反应体系中，在一定的浓度范围内相互配合，实现了对核酸样本的高效片段化切割，同时避免了额外单链的产生，构建的文库进行二代测序，获得的测序数据颠倒嵌合假阳性突变率低，解决了现有片段化酶法文库构建方法的测序数据单核苷酸位点变异或基因嵌合突变率假阳性背景高的问题，在文库构建领域具有重要意义。

公开(公告)号：CN111690626B

公开(公告)日：2021-03-26

申请号：CN202010634495.9

申请日：2020-07-02

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 曹林 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏 ,  张力军 ,  吴恒 ,  韩锦雄 ,  江明扬

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明提供了一种融合型Taq DNA聚合酶及其制备方法和应用，所述融合型Taq DNA聚合酶包括Taq DNA聚合酶突变体和DNA结合蛋白，所述Taq DNA聚合酶突变体为将野生型Taq DNA聚合酶的螺旋‑发夹‑螺旋DNA结合区的一个或多个位点进行取代突变而获得的蛋白质。本发明的融合型Taq DNA聚合酶具有增强的核酸结合能力、扩增速度和对杂质的耐受能力，对逆转录酶的抑制作用具有良好的抗性，对痕量模板具有良好的扩增性能，可以省略核酸提取步骤而直接对生物样本进行检测；由此构建的一步法RT‑qPCR试剂盒检测速度快、灵敏度高、准确性好，在RNA病毒检测领域具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN112029748B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN202010980814.1

申请日：2019-10-29

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 曹林 ,  瞿志鹏 ,  聂俊伟 ,  韩锦雄 ,  张力军 ,  江明扬 ,  赵芳芳

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开Taq DNA聚合酶突变体Mut4及其应用，所述突变型Taq DNA聚合酶在SEQ ID NO.1所示的序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代，各取代用三联体表示：字母‑数字‑字母，其中数字表示突变氨基酸的位置，数字前的字母对应突变涉及的氨基酸，数字后的字母表示用于置换数字前氨基酸的氨基酸：T386A，A407L，F413Y。本发明所述的突变体，可以通过改变酶的构象，提高酶的耐受能力，很好的应用于血液样本的扩增。

公开(公告)号：CN111139532B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN202010111715.X

申请日：2020-02-24

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 韩锦雄 ,  江明扬 ,  张力军 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏 ,  吴恒

IPC: C40B50/06 ,  C12N9/12

Abstract: 本发明公开了一种一种DNA和RNA同时构建测序文库的方法及试剂盒，所述方法包括以下步骤：(1)将反应底物中的RNA逆转录形成RNA/cDNA复合双链；(2)在逆转录产物cDNA/RNA复合双链和DNA双链的混合物中直接加入Tn5转座酶及打断缓冲液进行片段化，打断的同时在双链的5’端加上部分接头序列；(3)链置换和文库扩增：所得产物中加入扩增缓冲液、链置换和扩增酶混合物，进行PCR扩增；(4)磁珠纯化即可得到原始DNA/RNA的可测序文库。本发明所述方法大大减少了建库步骤，缩短了建库时间，提高文库产出和下机数据质量，帮助得到更多真实信息。

公开(公告)号：CN110747183B

公开(公告)日：2020-10-23

申请号：CN201911038688.1

申请日：2019-10-29

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 瞿志鹏 ,  聂俊伟 ,  韩锦雄 ,  曹林 ,  张力军 ,  江明扬 ,  赵芳芳

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开Taq DNA聚合酶突变体及其应用，所述突变型Taq DNA聚合酶在SEQ ID NO.1所示的序列中，具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代，各取代用三联体表示：字母‑数字‑字母，其中数字表示突变氨基酸的位置，数字前的字母对应突变涉及的氨基酸，数字后的字母表示用于置换数字前氨基酸的氨基酸：T386A，A407L，F413Y。本发明所述的突变体，可以通过改变酶的构象，提高酶的耐受能力，很好的应用于血液样本的扩增。

公开(公告)号：CN111188094B

公开(公告)日：2020-10-16

申请号：CN202010111731.9

申请日：2020-02-24

Applicant: 南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 聂俊伟 ,  韩锦雄 ,  江明扬 ,  张力军 ,  瞿志鹏 ,  吴恒

IPC: C40B50/06 ,  C12N1/04

Abstract: 本发明公开一种用于病原微生物检测的测序文库构建方法和试剂盒，所述方法包括(1)将提取的样本放入样本保存液，进行DNA/RNA共提取，并对宿主rRNA进行去除；(2)加入逆转录酶使其中的RNA逆转录形成RNA/cDNA复合双链；(3)逆转录产物cDNA/RNA复合双链和DNA双链的混合物中直接加入突变型Tn5转座酶及打断缓冲液进行片段化，片段化结束后用终止反应液5×TS‑plus进行终止反应；(3)加入扩增缓冲液、链置换和扩增酶混合物，进行PCR扩增；(4)磁珠纯化即得到原始DNA/RNA的可测序文库。所述方法大大减少了建库步骤，缩短建库时间，降低对样本起始量的要求，提高文库产出和下机数据质量。

公开(公告)号：CN111763664A

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN202010599034.2

申请日：2020-06-28

Applicant: 江苏康科斯医疗科技有限公司 ,  南京诺唯赞生物科技股份有限公司

Inventor： 曹林 ,  聂俊伟 ,  瞿志鹏 ,  张力军 ,  韩锦雄 ,  江明扬 ,  邱翠

IPC: C12N9/16 ,  C12N9/12 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明提供了一种用于构建测序文库的酶反应液及其应用，所述酶反应液包括酶组合物和反应缓冲液；所述酶组合物包括核酸内切酶、DNA聚合酶和多聚核苷酸激酶；所述反应缓冲液包括金属盐、底物和缓冲介质水溶液。本发明通过优化酶反应液的配方，通过一步反应实现对核酸样本的切割、末端修复和加A尾处理，在适宜的缓冲体系中，酶切反应速率和末端修复反应速率达到平衡，在样本起始量为100pg-1μg、处理时间相同的情况下，获得了长度分布一致的测序文库。