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公开(公告)号：CN114807089B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210744530.1
申请日：2022-06-29
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体APPAmut7和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变，这些突变涉及优化共进化过程中的关键残基，从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变，植酸酶突变体与亲本相比，植酸酶热稳定性增强，其中APPAmut7在65°C下的t1/2达到38.7 min，为亲本APPAmut4的11.4倍。本发明克服了现有技术的不足，提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此，本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中，有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114807087B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210739640.9
申请日：2022-06-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变，这些突变可能涉及引入二硫键、降低解折叠自由能、优化共进化过程中的关键残基，从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变，植酸酶突变体与亲本相比，植酸酶热稳定性增强，其中最佳突变体APPAmut9在100°C处理5 min后仍保留70%左右的活性，而野生型酶早已失活。本发明克服了现有技术的不足，提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此，本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中，有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114807087A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210739640.9
申请日：2022-06-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高植酸酶热稳定性的方法及突变体和应用。本发明对植酸酶进行了系列突变，这些突变可能涉及引入二硫键、降低解折叠自由能、优化共进化过程中的关键残基，从而显著提高了酶的热稳定性。本发明对植酸酶APPAmut4进行突变，植酸酶突变体与亲本相比，植酸酶热稳定性增强，其中最佳突变体APPAmut9在100°C处理5 min后仍保留70%左右的活性，而野生型酶早已失活。本发明克服了现有技术的不足，提供了具有高热稳定性的适合于在能源、食品和饲料等领域中应用的植酸酶突变体。因此，本发明提供的植酸酶突变体可以很好的应用于能源、食品和饲料行业中，有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114686458A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210563769.9
申请日：2022-05-23
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及调控基因28781及其调控里氏木霉纤维素酶表达的应用和方法。本发明提供的这种纤维素酶表达相关的转录因子28781对于纤维素酶活性表达具有调节作用，通过构建该基因的干扰质粒，并用其转化宿主菌，在宿主菌中抑制转录因子28781的表达可提高宿主菌的蛋白表达量和纤维素酶酶活。本发明丰富了里氏木霉纤维素酶的转录调控网络，为提高纤维素酶产量，降低纤维素酶成本，实现纤维素有效利用提高了新途径。
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公开(公告)号：CN114685632A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210563760.8
申请日：2022-05-23
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及转录抑制因子121121的应用及提高里氏木霉纤维素酶表达量和酶活的方法。本发明的纤维素酶表达相关的转录抑制因子121121对于纤维素酶活性表达具有调节作用，通过构建该基因的敲除质粒，并用其转化宿主菌，在宿主菌中敲除转录抑制因子121121的表达可提高宿主菌的蛋白表达量和纤维素酶酶活。本发明丰富了里氏木霉纤维素酶的转录调控网络，为提高纤维素酶产量，降低纤维素酶成本，实现纤维素有效利用提高了新途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114350642B
公开(公告)日：2022-05-31
申请号：CN202210266754.6
申请日：2022-03-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种提高木聚糖酶的木二糖产量的方法及突变体和应用。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。以山毛榉木木聚糖为底物，在pH6.5，37℃条件下反应2h，突变体木二糖终产量为6869nm，比野生型（5990nM）高出15%，同时该突变体的木糖产量也比野生型高12%（4355nm vs.3894nm）。
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公开(公告)号：CN113930401B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111566938.6
申请日：2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及提高漆酶催化活性的方法及突变体Lcc9‑M1、基因和应用。野生型漆酶Lcc9经定点突变后得到催化活性提高的突变体。本发明的漆酶突变体具有良好的酶学性质，可以应用于饲料、食品、污水处理、医药等行业。
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公开(公告)号：CN113684198A
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202111251317.9
申请日：2021-10-27
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高纤维素酶催化效率的方法及突变体5I77‑M2。所述方法包括将氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的野生型纤维素酶的第300位的氨基酸Thr突变为氨基酸Pro和将第307位点的氨基酸Asp突变为氨基酸Pro、以及第193位的氨基酸Asn突变为Ala的步骤。酶促反应的最适pH值、最适温度并未发生变化；以羧甲基纤维素钠为底物时，本发明的突变体5i77‑M2的比活力比突变体5I77‑M提高了50%。
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公开(公告)号：CN112877272B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110465033.3
申请日：2021-04-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本申请涉及农业生物技术领域，具体涉及一种N‑乙酰氨基葡萄糖的大肠杆菌工程菌及发酵生产方法。本发明通过截断糖酵解途径和磷酸戊糖途径对N‑乙酰氨基葡萄糖合成前体6‑磷酸果糖的分流，提高了突变型大肠杆菌底盘细胞中的产物前体供应，再利用游离的高拷贝质粒在底盘细胞内表达了N‑乙酰氨基葡萄糖合成途径的关键酶，利用混合碳源培养基发酵生产N‑乙酰氨基葡萄糖，N‑乙酰氨基葡萄糖的产量达到2.8 g/L。
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公开(公告)号：CN112961792B
公开(公告)日：2021-09-17
申请号：CN202110537610.5
申请日：2021-05-18
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种生产肌醇的毕赤酵母工程菌及发酵方法。本发明通过在毕赤酵母中过表达内源和外源的肌醇合成关键酶基因，并敲除肌醇转运蛋白基因，提升毕赤酵母积累肌醇的能力；通过敲除果糖‑6‑磷酸激酶2（Pfk2）基因，并利用甘油诱导启动子调控表达葡萄糖‑6‑磷酸异构酶（Pgi）基因、果糖‑6‑磷酸激酶1（Pfk1）基因和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶（Zwf）基因，实现在以葡萄糖为碳源时弱化糖酵解和磷酸戊糖途径的目的，从而提高肌醇合成前体物葡萄糖‑6‑磷酸的供给。在高密度发酵中，利用甘油和葡萄糖在培养基中的添加时间来控制菌体生长及肌醇的生产，大大提高了毕赤酵母工程菌株肌醇的生产能力。
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