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公开(公告)号：CN114540402A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210024889.1
申请日：2022-01-11
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/80 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , C12N1/15 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种检测橡胶树白粉菌遗传转化效率的方法，所述方法包括如下步骤：将重组丝状真菌接种至橡胶树古铜期叶片上进行培养后喷施潮霉素B进行筛选，取发病叶片连同菌丝用GUS染色液进行染色，被染成蓝色的菌丝所对应的重组丝状真菌即为转化成功的转化子。本发明提供了一种可用于转化橡胶树白粉菌等丝状真菌且可用于评估橡胶树白粉菌转化体系转化效率的重组质粒，此重组质粒携带由橡胶树白粉菌核糖体蛋白编码基因RP60启动子序列融合GUS基因序列的重组报告基因。使用此重组质粒转化橡胶树白粉菌时，可对转化后获得的转化子菌丝进行简单的GUS染色来判断报告基因是否转化成功，相比以往传统检测转化子的方法检测效率更高。
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公开(公告)号：CN114540401A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210013027.9
申请日：2022-01-06
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/80
Abstract: 本发明公开了一种用于橡胶树白粉菌遗传转化的多菌灵抗性筛选标记，属于生物技术领域。本发明提供了一种可用于橡胶树白粉菌等丝状真菌遗传转化的多菌灵抗性筛选载体，具体使用重组质粒转化至橡胶树白粉菌，转化成功的橡胶树白粉菌产生多菌灵抗性基因，应用此多菌灵抗性基因作为橡胶树白粉菌遗传转化筛选标记。重组质粒包含第一酶切位点、第二酶切位点、橡胶树白粉菌RP60基因启动子、β‑Tub(E198A)突变基因、终止子和抗性基因。使用此重组质粒转化橡胶树白粉菌时，可用多菌灵对转化后的转化子进行筛选，转化成功的重组白粉菌可产生多菌灵抗性。该筛选标记的开发应用解决了橡胶树白粉菌转化的筛选标记问题。
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公开(公告)号：CN110117556B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN201910239697.0
申请日：2019-03-27
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明涉及微生物领域，特别是一种产脂肽类物质的生防菌，为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）HN‑2，于2018年06月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2018382。本发明还公开了贝莱斯芽孢杆菌HN‑2的发酵工艺。通过活性测定，发现该菌株发酵液的提取物在烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）侵染烟草时对烟草有保护作用，可诱导烟草防卫反应，提高烟草对TMV的抗性，具有较高的经济效益。
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公开(公告)号：CN112280757B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202011194768.9
申请日：2020-10-31
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明提供一种炭疽菌脂肪酸羟化酶CsSCS7的应用及构建基因敲除载体、基因敲除突变体的方法，具体为炭疽菌脂肪酸羟化酶CsSCS7在降解杀菌剂中的应用，本发明通过构建CsSCS7基因敲除载体，获得CsSCS7基因敲除突变体，经过功能性实验，证实了该羟化酶对炭疽菌真菌菌丝生长极为重要，并参与调控真菌对咯菌腈的降解，可应用于对咯菌腈等吡咯类杀菌药剂降解的功能，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114373506A
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202111671919.X
申请日：2021-12-31
Applicant: 海南大学
IPC: G16B20/00
Abstract: 本发明提供一种真核生物泛转录组注释方法，包括以下步骤：将3个以上不同来源的真核物种样品转录组数据比对到参考基因组上，获得相应的基因结构注释信息，整合，得到依赖参考基因组的转录组注释结果；将样品转录组数据进行拼接组装，获得相应的成熟转录本序列信息，将成熟转录本序列信息比对参考基因组，获得相应的基因结构信息，得到不依赖参考基因组的转录组注释结果；整合结构转录本注释信息，过滤无法比对参考基因组的转录本，得新的转录本注释信息；整合样品高通量转录组数据，可获得目标真核物种的泛转录组注释信息。本发明可获得真核生物更加完整的转录组注释结构，采用不同策略相互辅证，极大地提高了注释准确率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114317586A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111675968.0
申请日：2021-12-31
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明公开了一种标记橡胶树白粉菌的荧光载体，所述荧光载体为基于pJNARG质粒改造的质粒pJNARG‑RP60‑GFP，该质粒在XcmI酶切位点处被插入了一个多菌灵抗性基因，质粒pJNARG‑RP60‑GFP的多克隆位点在启动子RP60和GFP绿色荧光蛋白编码基因之间。本发明提供了用于评价白粉菌转化效率的有力工具，即用电击转化法转化含有荧光基因的质粒，使其在白粉菌细胞中表达荧光基因，并通过荧光标记所转化的白粉菌细胞计算白粉菌转化效率，从而有利于研究其他同时导入白粉菌细胞的外源或自身基因的作用。
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公开(公告)号：CN114287446A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111505850.3
申请日：2021-12-10
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明提出了一种诱导植物防治真菌病害的生物制剂及其制备方法、应用，包括如下重量份的原料：5‑20份贝莱斯芽孢杆菌HAB‑2、5‑10份地衣芽孢杆菌、3‑10份绿僵菌和1‑3份γ‑氨基丁酸。本发明联合生防菌剂和诱导剂，制备的诱导植物防治真菌病害的生物制剂，不仅可诱导植株系统获得抗性，激活植株的防御系统，从而增强植株本体防治真菌病害，还可促进和加快植株的生长发育。可用于诱导香蕉、菠萝、番石榴和草莓防治炭疽病、叶斑病和轮斑病，其田间施用效果良好，防治效果与农药防治相当，绿色健康无污染，制备和使用方法简单，对由真菌导致的植物病害具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN114164120A
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN202111370049.2
申请日：2021-11-18
Applicant: 海南大学
IPC: C12N1/14 , C12N1/20 , A01N63/22 , A01N63/38 , A01N63/30 , A01P3/00 , C12R1/07 , C12R1/885 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于防治植物病害的微生物制剂，其特征在于，其包括以下重量份的微生物制剂：贝莱斯芽孢杆菌HAB‑2 10‑20份，哈茨木霉菌5‑10份，白僵菌1‑5份，绿僵菌1‑3份；其中，所述贝莱斯芽孢杆菌HAB‑2的保藏编号为：CCTCC NO:M 2015070。相应的，本发明还提供了上述微生物制剂的制备方法及其应用。本发明的微生物制剂对于槟榔炭疽病、番石榴叶枯病、脐橙炭疽病、龙眼叶斑病、莲雾果腐病等的防治效果显著，可以有效降低发病率。
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公开(公告)号：CN111548398B
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202010447861.X
申请日：2020-05-25
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明提供一种炭疽菌转录因子CsATF1及应用，该基因含有2个内含子，编码536个氨基酸，含有三个Aft1结构域和一个BRLZ(碱性亮氨酸拉链)结构域，为bZIP转录因子家族中的ATF转录因子。实验证实了该转录因子参与调控真菌对咯菌腈等吡咯类药剂敏感性，说明CsATF1可应用于制备杀菌增强剂。
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公开(公告)号：CN113999859A
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202111275789.8
申请日：2021-10-29
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/31 , C12N15/80 , C12N1/15 , C12Q1/6895 , C12R1/645
Abstract: 本发明提供一种橡胶树白粉菌无毒基因的筛选方法、效应蛋白及应用，该筛选方法，包括：(1)由橡胶树白粉菌基因中选取潜在效应蛋白的编码基因A；(2)构建橡胶树白粉菌效应蛋白表达载体，在胶孢炭疽菌中表达转化该白粉菌的潜在效应蛋白基因A，得炭疽菌转化子；(3)将效应蛋白表达程度高的炭疽菌转化子培养，接种至离体的橡胶叶片，测定其致病能力；若相比野生型，胶孢炭疽菌转化子的致病力下降，则表明该效应蛋白编码基因A为无毒基因。本发明的筛选方法，可直接通过不同效应蛋白基因转化子的致病力筛选出白粉菌无毒基因，实现橡胶树白粉菌无毒基因的更加快速地筛选和鉴定，有利于加强橡胶白粉病的防控以及抗病品种选育。
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