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公开(公告)号：CN108018273B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810097101.3
申请日：2018-01-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种长链不饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据华根霉脂肪酶(RCL)结构分析，对其进行定点突变，获得了脂肪酸特异性改变的突变酶。比较野生型脂肪酶与突变酶催化水解大豆油的能力，得到了水解率远高于野生型脂肪酶的突变酶HQL，水解率达到98％左右。
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公开(公告)号：CN110904073A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911352620.0
申请日：2019-05-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用，属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好，因此，本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。
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公开(公告)号：CN104560933B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201410820656.8
申请日：2014-12-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/96
Abstract: 本发明公开了一种液态脯氨酸特异性内切蛋白酶复配酶制剂，属于酶制剂技术领域。本发明提供的脯氨酸特异性内切蛋白酶复配酶制剂，具有极其优异的储存稳定性，在4℃保存一年，其酶活保留率仍达90％以上，在37℃保存15天，其酶活保留率仍达50％以上，保存30天，其酶活保留率仍高达45％以上，解决了由于产品运送或储存时间较长导致产品应用性能迅速下降的问题。本发明提供的液体酶制剂复配方法简单，原料来源丰富并且成本低，特别适合在工业上推广。
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公开(公告)号：CN108034647A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810095366.X
申请日：2018-01-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据华根霉脂肪酶(RCL)结构分析，对其进行定点突变，获得了脂肪酸特异性改变的突变酶。比较野生型脂肪酶与突变酶催化水解动物油的能力，得到了水解率远高于野生型脂肪酶的突变酶。相比野生型RCL，突变酶T286Q、I281F和A116W/I281F由于增强了对饱和脂肪酸的特异性，其对猪油水解率分别由55％提高到了85％、90％和86％。
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公开(公告)号：CN106047732A
公开(公告)日：2016-10-26
申请号：CN201610356374.6
申请日：2016-05-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高分泌型耐热酵母基因工程菌及其应用，属于生物技术领域。本发明采用诱变和驯化，得到了一株能够在高温下高分泌量表达脂肪酶基因的酵母基因工程菌，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)、保藏编号为CCTCC NO:M 2016278。经测序分析，脂肪酶基因及其启动子序列均未发生突变，说明诱变菌株高分泌量表达脂肪酶基因是由于基因组中其他基因序列发生了突变导致的。通过同源双交换的方式将脂肪酶基因敲除，构建的敲除菌株能够作为其他外源蛋白的表达宿主，可应用于提高其他外源基因的表达水平，并且可以在高温发酵条件进行发酵。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103589741B
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201310567472.0
申请日：2013-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种新的脯氨酸特异性内切蛋白酶基因及其应用，其特征在于其核苷酸序列如以下1）或2）所示：1）其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示核苷酸序列；2）在1）限定的核苷酸序列基础上经碱基的缺失、取代、插入或突变而成且具有编码有活性的脯氨酸特异性内切蛋白酶的核苷酸序列。采用本发明提供的基因获得的重组酶具有脯氨酸特异性内切蛋白酶活性以及耐酸性环境等优点，对提高啤酒，葡萄酒，果汁饮品等非生物稳定性具有明显效果，具有重大应用潜力。
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公开(公告)号：CN104099356A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201410280742.4
申请日：2014-06-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明为一种通过分子改造前肽获得的高表达量脂肪酶基因及其应用，公开了一种高表达量的脂肪酶基因，其DNA序列如以下1)或2)所示；1)DNA序列为SEQ ID NO：2所示核苷酸序列；2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码具有脂肪酶活性的蛋白质的DNA分子。本发明具体提供的截短后的脂肪酶基因，在巴斯德毕赤酵母中的表达量较亲本华根霉脂肪酶得到了提高，用于表达后，可显著提高时空产率。
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公开(公告)号：CN102250855B
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201110222763.7
申请日：2011-08-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种脂肪酶的高效生产方法，发酵阶段采用了两段式溶氧控制策略，实现脂肪酶的高效表达，降低后续提取的难度；分离提取阶段通过过料液循环与渗透液循环实现发酵与提取的偶联。应用本本发明使得酶不断被实时的分离和浓缩富集，减少了发酵罐中酶表达的同时被蛋白酶降解的程度，提取酶活得率可达85％以上，菌落总数小于10CFU/ml，大肠菌群小于3，酵母与霉菌小于10CFU/ml，致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌)未检出。通过渗透液循环可大幅减少了用水量和废水产生量，节能减排。本方法实现了脂肪酶的高效清洁生产，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102604911B
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201210083913.5
申请日：2009-11-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 高活力华根霉脂肪酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了一种由华根霉（Rhizopus chinensis）CCTCC M 201021脂肪酶基因经定向进化而获得的一系列脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中，涉及到的氨基酸突变为Ala129Ser、Lys161Arg、Thr195Tyr、Ala230Thr、Val261Gly、Lys322Arg、Ser373Asn以及上述氨基酸两个、三个或四个突变的组合。以转换数Kcat表示，这些突变体的酶活较出发菌株得到了提高。
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公开(公告)号：CN102604912B
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210083915.4
申请日：2009-11-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 高活力华根霉脂肪酶突变体，其由华根霉（Rhizopuschinensis）CCTCCM201021脂肪酶基因，其Genbank登录号EF405962，运用易错PCR方法，通过多轮重组和定点突变，经定向进化而获得的脂肪酶突变体，在突变体的氨基酸序列中，包含氨基酸突变Thr195Tyr；以转换数Kcat表示，脂肪酶突变体的酶活较出发菌株得到了提高。
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