一种基因枪介导的杂交鹅掌楸转化体系的构建方法

    公开(公告)号:CN107760721A

    公开(公告)日:2018-03-06

    申请号:CN201711260530.X

    申请日:2017-12-04

    CPC classification number: C12N15/895 A01H4/00

    Abstract: 本发明公开了一种基因枪介导的杂交鹅掌楸转化体系的构建方法,包括:1)取杂交鹅掌楸胚性愈伤组织,进行高渗处理;2)提取质粒,制备金粉,制备微弹;3)基因枪轰击;4)将愈伤组织转移至恢复平日养鸡进行暗恢复培养;5)体胚诱导培养,长出体胚后进行光照培养,长出小苗后接种于生根培养基进行筛选培养;6)分子检测,获得杂交鹅掌楸转化体系。本发明的基因枪介导的杂交鹅掌楸转化体系的构建方法,不仅探索出了基因枪转化杂交鹅掌楸体系的可行性,还为今后用基因枪介导目的基因转化杂交鹅掌楸提供了可靠的实验基础,从而不仅为功能基因转化杂交鹅掌楸开创了一种新的技术,还为研究各功能基因在杂交鹅掌楸中的作用提供技术支持。

    一种鹅掌楸纤维素合酶基因LcCESA1及其表达蛋白和应用

    公开(公告)号:CN107739738A

    公开(公告)日:2018-02-27

    申请号:CN201711258288.2

    申请日:2017-12-04

    Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸纤维素合酶基因LcCESA1及其表达蛋白和应用,LcCESA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明以模式植物拟南芥为研究对象,将克隆得到的中国鹅掌楸纤维素合酶基因LcCESA1利用农杆菌介导转化至拟南芥中,通过筛选与培育,最终获得T3代纯合转基因植株;通过观察野生型拟南芥与转基因拟南芥的显微结构,发现转基因拟南芥的茎段维管束组织细胞细胞壁和叶片组织细胞细胞壁的厚度,均与野生型拟南芥存在差异,可见LcCESA1基因对拟南芥茎段维管束组织细胞细胞壁和叶片组织细胞细胞壁均有影响,可促进纤维素的积累,将具有广泛的应用。

    一种杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法

    公开(公告)号:CN106069785B

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201610652356.2

    申请日:2016-08-10

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法,包括:1)杂交鹅掌楸胚性愈伤组织的诱导;2)以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L+氨基寡糖素0.01~0.1mg/L为基本培养基,24℃暗培养杂交鹅掌楸胚性愈伤组织;3)将材料转移至光照培养室组培瓶中,以3/4MS基本培养基继续培养至再生植株;4)将再生植株驯化后移栽。本发明的杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法,通过纯固体培养方式,跳过体胚发生过程中悬浮培养和平板培养这两个体胚诱导环节,优化并丰富杂交鹅掌楸体胚发生系统,从而更加高效便捷地获得高质量体胚再生植株。建立出稳固、高频、操作简单、苗木抗性良好的杂交鹅掌楸纯固体培养基体胚发生体系,为建立更加高效的杂交鹅掌楸遗传转化受体体系提供参考。

    一种利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法

    公开(公告)号:CN106962191A

    公开(公告)日:2017-07-21

    申请号:CN201710184581.2

    申请日:2017-03-24

    CPC classification number: A01H4/005 A01H4/001

    Abstract: 本发明公开了一种利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体胚发生的方法,包括种子灭菌、胚性愈伤组织的诱导、胚性悬浮细胞系的建立、液体单细胞的获得及过渡、诱导杂交鹅掌楸体胚的发生步骤,其特征在于,在诱导杂交鹅掌楸体胚的发生时,在培养基中添加茉莉酸甲酯和ABA,或单独添加茉莉酸甲酯。本发明的利用茉莉酸甲酯进行杂交鹅掌楸体快繁的方法,在杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生过程中,加入植物生长调节剂MeJa有效提高体胚诱导率、降低畸形率,进一步的提高杂交鹅掌楸体胚发生效率,具有很好的实用性,利于杂交鹅掌楸快繁体系的建立。

    一种翅果油树定芽增殖与植株再生方法

    公开(公告)号:CN106305428A

    公开(公告)日:2017-01-11

    申请号:CN201610780875.7

    申请日:2016-08-30

    CPC classification number: A01H4/008 A01H4/001

    Abstract: 本发明公开了一种翅果油树定芽增殖与植株再生的方法,该方法根据翅果油树腋芽处易萌发新芽的特点,采用成熟翅果油树种子无菌萌发获得实生苗,剪取带有腋芽或顶芽的幼嫩茎段为外植体,通过组织培养的方法促进腋芽萌发、伸长,获得具有一定木质化程度的健壮新枝,从而实现增殖的目的,然后经生根培养实现植株再生。本发明采用定芽增殖的方法,避开了传统的翅果油树组织培养方法中愈伤及不定芽诱导过程中易出现褐化的问题,操作简单、可行。

    一种利用去离子甲酰胺进行杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法

    公开(公告)号:CN106212287A

    公开(公告)日:2016-12-14

    申请号:CN201610654581.X

    申请日:2016-08-10

    CPC classification number: A01H4/001 A01H4/008

    Abstract: 本发明公开了一种利用去离子甲酰胺进行杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法,包括:1)杂交鹅掌楸胚性愈伤组织的诱导;2)以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L+去离子甲酰胺0.01~1mg/L为基本培养基,24℃暗培养杂交鹅掌楸胚性愈伤组织;3)将材料转移至光照培养室组培瓶中,以3/4MS基本培养基继续培养至再生植株;4)将再生植株驯化后移栽。本发明通过纯固体培养方式,跳过体胚发生过程中悬浮培养和平板培养这两个体胚诱导环节,优化并丰富杂交鹅掌楸体胚发生系统,从而更加高效便捷地获得高质量体胚再生植株。建立出稳固、高频、操作简单、苗木抗性良好的杂交鹅掌楸纯固体培养基体胚发生体系,为建立更加高效的杂交鹅掌楸遗传转化受体体系提供参考。

    一种杂交鹅掌楸LhPIN3基因及其应用

    公开(公告)号:CN104004772B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410259910.1

    申请日:2014-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhPIN3基因及其应用,该杂交鹅掌楸LhPIN3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在建立成熟的杂交鹅掌楸体胚发生体系的基础上,克隆生长素运输蛋白基因LhPIN3,通过表达分析,证明了杂交鹅掌楸的LhPIN3基因在杂交鹅掌楸体胚发生过程中对胚性细胞发育和体胚苗生长有较大的影响,其过表达试验发现LhPIN3的过表达会影响植株的生长发育,另外LhPIN3的表达还可以部分拯救拟南芥LhPIN3基因功能完全丧失的pin1突变体,使其恢复表型,开花并结出荚果,因此可应用于植物体胚发生、不定根诱导、不定芽的诱导和分化等,具有很好的应用前景。

    一种杂交鹅掌楸LhWOX1基因及其应用

    公开(公告)号:CN103333901A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310273285.1

    申请日:2013-07-02

    Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhWOX1基因及其应用,LhWOX1基因的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。LhWOX1基因是SAM发育所必需的报告基因。在SAM的生长发育中,LhWOX1起到了非常重要作用,它与干细胞marker基因CLV3形成了负反馈调节。在杂交鹅掌楸LhWOX1基因过表达的T1代植株中,干细胞的数量增加并存在进一步分化。这对于干细胞以及胚胎发育的研究都具有重要意义。在杂交鹅掌楸的LhWOX1基因过量表达的T1代植株中,植株的主茎发生了不同程度的螺旋化,说明LhWOX1参与维管组织的发育调控网络。可见,杂交鹅掌楸的LhWOX1基因在杂种鹅掌楸育种中将具有广泛的应用。

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