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公开(公告)号：CN115927017B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202310030705.7
申请日：2023-01-10
Applicant: 南京高新工大生物技术研究院有限公司 , 南京工业大学
Abstract: 本发明属于食用菌选育技术领域，具体涉及一株红平菇高产真菌及其在产纤维素酶中的应用。本发明通过从已知15株大型真菌筛选出生长速率和纤维素酶活最高的一株红平菇作为出发菌株，经过尖端分离驯化进一步提升其生长速率，生物量及蛋白产量。从5种酶体系中筛选出原生质体数量最多的、再生率最高的、再生时间最短的酶系M2，并对ARTP诱变技术条件进行探究，筛选最佳诱变时间等条件。最后，采用酶系M2制备原生质体联合ARTP诱变技术，选育出了一株生长速度快、高纤维素酶活和高产蛋白的红平菇菌株GXGD‑EF‑13‑JD‑1，其分类命名为红平菇Pleurotus djamor，菌株号GXGD‑EF‑13‑JD‑1，已于2022年11月09日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：62953。
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公开(公告)号：CN112725323B
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202110163676.2
申请日：2021-02-05
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组耐盐腺苷酸环化酶及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，长度为1008 bp，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，共335个氨基酸，理论分子量为36.09 kDa。该耐盐腺苷酸环化酶最适pH为10.0，最适温度为45℃，该重组耐盐腺苷酸环化酶活性随着氯化钠浓度的提高而增强，在氯化钠浓度为2.5 M时酶活性达到最大(约22倍)，具有良好的耐盐性，与现有报道的腺苷酸环化酶相比，其在高渗条件下能更好地提高生产效率，具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116121078A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211695744.0
申请日：2022-12-28
Applicant: 南京高新工大生物技术研究院有限公司 , 南京工业大学
Abstract: 本发明属于食用菌加工领域，具体涉及一种联合制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体的方法。本发明选择诱变后的高产牛排菇GXGD‑EF‑8‑1作为发酵菌种，以液体发酵技术快速高效获得菌丝体为原料，通过改良发酵培养基，采用气升式半连续发酵工艺，对发酵后的菌体进行乙醇溶液去脂和胶体磨破壁后再酶解等方式，联合生产制备高蛋白粉和高核酸破壁菌丝体。其中，所述的高蛋白粉，其粗蛋白含量为85％(w/w)以上；所述的高核酸破壁菌丝体，其核酸含量为20％(w/w)以上，实现了牛排菇的高价值转化和产物附加值最大化的同时，提高了发酵效率和酶解效率。
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公开(公告)号：CN116064341A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210819917.9
申请日：2022-07-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了异源表达cspB基因生物成膜固定化发酵产赖氨酸的重组谷氨酸棒杆菌；所述重组谷氨酸棒杆菌的构建方法，包括以下步骤：(1)扩增目的基因cspB；(2)将目的基因cspB克隆到质粒pXMJ19的XbaI酶与Kpnl酶的两个酶切位点之间，得到重组质粒pXMJ19‑cspB；(3)将重组质粒pXMJ19‑cspB转化到大肠杆菌DH5α感受态中，筛选得含重组质粒pXMJ19‑cspB的大肠杆菌，再提取重组质粒pXMJ19‑cspB；(4)将提取得到的重组质粒转化到谷氨酸棒杆菌感受态中。本发明将生物膜和固定化发酵技术相结合，同时缩短了发酵周期、实现了细胞的可循环使用，节约了成本。
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公开(公告)号：CN115786150A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202210966122.0
申请日：2022-08-12
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种表面展示β‑半乳糖苷酶的重组毕赤酵母菌的构建方法与应用，所述重组毕赤酵母菌是在原始毕赤酵母Pichia pastoris GS115中异源表达来源于米曲霉BK03的β‑半乳糖苷酶基因lacA与来源于酿酒酵母的细胞壁蛋白Flo1p。本发明通过将β‑半乳糖苷酶通过表面展示技术展示在细胞表面，酶的稳定性更好；同时，β‑半乳糖苷酶能够更多次地被重复利用，产低聚半乳糖的量较高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112760241B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202110148438.4
申请日：2021-02-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组产黄青霉基因工程菌及其构建方法与应用，所述重组产黄青霉基因工程菌由原始产黄青霉菌中StuA基因被Bleo抗性基因替代所得。本发明所提供的基因工程菌使产黄青霉在固定化发酵生产青霉素过程中生物膜量OD570增多了约2.5倍，使菌丝更好的吸附结合在塑料介质上；提高了菌种的抗逆性，使发酵过程中菌种形态更稳定；提高了青霉素的效价达到2126.775U/mL，同时缩短了整个发酵周期约24h，从而提高了发酵效率并减少了生产成本，有效解决了现有技术中产黄青霉发酵生产青霉素菌种形态不稳定，发酵周期长且持续性差，导致发酵效率低且成本高的问题。
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公开(公告)号：CN114292761A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111457265.0
申请日：2021-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株黑曲霉基因工程菌及构建方法与应用，所述重组黑曲霉基因工程菌为在出发菌中过表达铁获取调控基因AcuK，得到重组黑曲霉基因工程菌。本发明通过基因敲除手段构建了一株铁获取调控基因AcuK过表达的重组黑曲霉基因工程菌。该重组基因工程菌使黑曲霉在固定化发酵产柠檬酸过程中生物膜量增加的同时减轻载体抱团现象，发挥出固定化发酵的优势，提高了柠檬酸的产量，缩短了发酵周期。
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公开(公告)号：CN113151028A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110417320.7
申请日：2021-04-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程菌株及其构建方法和应用，所述酿酒酵母基因工程菌株在原始酿酒酵母中过表达ARO9基因或过表达ARO10基因。本发明通过过表达ARO9或ARO10基因，所得酿酒酵母基因工程菌株能提高生物膜的形成量，过表达ARO9的酿酒酵母基因工程菌株和过表达ARO10的酿酒酵母基因工程菌株的生物膜形成分别提高了18％和10％。
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公开(公告)号：CN112852654A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110143053.9
申请日：2021-02-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株PAS_chr1‑3_0141基因敲除的毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与应用，该基因工程菌由原始毕赤酵母的PAS_chr1‑3_0141基因失活后改造得到。本发明首次敲除PAS_chr1‑3_0141基因，在固定化发酵过程中，可增加毕赤酵母在固定化发酵中的粘附作用，成膜能力提高，提高了发酵效率，提升了毕赤酵母基因工程菌产植酸酶的发酵性能，不仅提高了产物酶酶活，酶活性更强、更稳定，增加固定化发酵的成膜量、缩短发酵的时间，而且改造后的毕赤酵母基因工程菌能进行多批次连续发酵，在发酵上具有明显优势。
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公开(公告)号：CN112779170A
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202110095568.6
申请日：2021-01-25
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组黑曲霉基因工程菌及构建方法和应用，所述重组黑曲霉基因工程菌中铁获取调控基因失活。该基因工程菌使黑曲霉在固定化发酵产柠檬酸过程中生物膜量减少，使载体孔径被堵死的现象得到有效缓解，增加了载体与外界的传氧传质效果，从而发挥出固定化发酵的优势，提高了柠檬酸的产量和糖酸转化率，缩短了发酵周期，有效解决了现有工业上黑曲霉发酵生产柠檬酸时产量低、发酵周期长的问题；且所得重组黑曲霉基因工程菌能够12批次连续发酵，发酵强度无明显下降。
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