一种用于核酸片段化的酶组合物及其应用

    公开(公告)号:CN113337487A

    公开(公告)日:2021-09-03

    申请号:CN202110181154.5

    申请日:2021-02-09

    Abstract: 本发明提供了一种用于核酸片段化的酶组合物及其应用,所述酶组合物包括用于片段化核酸的核酸内切酶和用于修复粘性末端的DNA聚合酶,还包括用于消化原始样本或反应过程中产生的单链,核酸内切酶、DNA聚合酶和核酸外切酶集中在一个反应体系中,在一定的浓度范围内相互配合,实现了对核酸样本的高效片段化切割,同时避免了额外单链的产生,构建的文库进行二代测序,获得的测序数据颠倒嵌合假阳性突变率低,解决了现有片段化酶法文库构建方法的测序数据单核苷酸位点变异或基因嵌合突变率假阳性背景高的问题,在文库构建领域具有重要意义。

    一种融合型Taq DNA聚合酶及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111690626B

    公开(公告)日:2021-03-26

    申请号:CN202010634495.9

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明提供了一种融合型Taq DNA聚合酶及其制备方法和应用,所述融合型Taq DNA聚合酶包括Taq DNA聚合酶突变体和DNA结合蛋白,所述Taq DNA聚合酶突变体为将野生型Taq DNA聚合酶的螺旋‑发夹‑螺旋DNA结合区的一个或多个位点进行取代突变而获得的蛋白质。本发明的融合型Taq DNA聚合酶具有增强的核酸结合能力、扩增速度和对杂质的耐受能力,对逆转录酶的抑制作用具有良好的抗性,对痕量模板具有良好的扩增性能,可以省略核酸提取步骤而直接对生物样本进行检测;由此构建的一步法RT‑qPCR试剂盒检测速度快、灵敏度高、准确性好,在RNA病毒检测领域具有广泛的应用前景。

    抗噬菌体群体侵染菌株、抗噬菌体元件及其应用

    公开(公告)号:CN117586920A

    公开(公告)日:2024-02-23

    申请号:CN202311623391.8

    申请日:2023-11-30

    Abstract: 本申请属于基因工程及微生物工程技术领域,公开了一种抗噬菌体群体侵染菌株、抗噬菌体元件及其在抵抗常见的多种噬菌体群体爆发中的应用。本申请通过制备DNA文库,转化大肠杆菌后筛选优化获得抗噬菌体元件PD‑AR2;然后以工程菌株E.coli BL21(DE3)为亲本株,通过基因工程改造、诱变筛选获得一株生长良好的重组蛋白表达菌株E.coli PRE12,该菌株可以有效抵抗噬菌体群体侵染,效果显著。本申请对重组蛋白表达菌株E.coli PRE12进行抗噬菌体性能、蛋白表达、生长曲线测定,结果表明该菌株具备显著优于E.coli BL21(DE3)的抗噬菌体性能,其生长能力和蛋白表达能力与E.coli BL21(DE3)基本一致。

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