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公开(公告)号：CN107254455A
公开(公告)日：2017-10-17
申请号：CN201611174270.X
申请日：2016-12-14
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12N9/14 , C12N15/8261
Abstract: 本发明公开了一种黄瓜植株微型化相关蛋白及其编码基因与应用，该蛋白的氨基酸序列如序列表2所示，属于AAA ATP酶家族，与微管结合蛋白相关；该蛋白的编码基因如序列表1所示的碱基序列，该碱基序列若发生突变，如1058bp位的胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)取代，编码的蛋白的353位丝氨酸(Ser)变为苯丙氨酸(Phe)，这样该蛋白抑制微管细胞正常发育，使微管细胞骨架缺失，排列异常，具体在植株表型为植株微型化，突变体植株高度只有正常野生型植株高度的20％左右，果实长度也只有正常野生型果实长度的10％左右，同时叶片和种子均明显变短。该蛋白及其编码基因的应用，可以为黄瓜株型的改良和杂交育种或转基因植物的开发创造条件。
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公开(公告)号：CN106957897A
公开(公告)日：2017-07-18
申请号：CN201610017929.4
申请日：2016-01-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了黄瓜幼叶黄化基因连锁的分子标记方法，属于生物技术领域。首次公开了与黄瓜幼叶黄化基因紧密连锁的分子标记SSR63，该标记正反向引物序列分别为：5′GCCTTCATCCTGTGGCGT 3′和5′CCAGTCATGGGTTTGTTGGA 3′。在幼叶黄化与绿叶黄瓜构建的F2中，引物SSR63F/SSR63R在幼叶黄化株系中均能扩增出226bp产物，在绿叶株系中均能扩增出204bp产物或同时含有204bp和226bp两条带的产物，与vyl紧密连锁。本发明公开的与黄瓜幼叶黄化基因vyl紧密连锁分子标记，可用于黄瓜幼叶黄化基因定位或分子标记辅助育种。
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公开(公告)号：CN106916879A
公开(公告)日：2017-07-04
申请号：CN201511003480.8
申请日：2015-12-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明线粒体基因组多态性构建黄瓜指纹图谱及其应用，涉及黄瓜线粒体基因组标记开发，不同黄瓜品种间进行线粒体基因组多态性标记筛选，线粒体DNA指纹图谱的构建，以及线粒体DNA指纹图谱在杂交F1种子纯度鉴定方面的应用——利用多态性标记对“南水3号”种子进行纯度鉴定，属于生物技术育种领域。本发明首次基于黄瓜线粒体基因组父系遗传特性构建“长春密刺”等21份黄瓜品种的线粒体DNA指纹图谱，首次应用黄瓜线粒体基因组多态性标记检测“南水3号”黄瓜种子纯度，为黄瓜品种的鉴定、遗传亲缘关系分析，分类与进化等研究提供了一种新的方法，为追踪杂交过程中父系线粒体基因组做技术准备，为制定种苗纯度早期鉴定技术规范奠定基础。
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公开(公告)号：CN105886602A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201410727972.0
申请日：2014-12-01
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明基于黄瓜线粒体父系遗传的特性，使用线粒体基因组SSR标记技术鉴定黄瓜杂交种纯度的一种方法，涉及黄瓜线粒体基因组SSR标记开发，用开发的黄瓜线粒体标记分别对不同生态型的黄瓜品种进行多态性筛选，以及利用多态性标记对黄瓜F1种子进行纯度检测，属于生物技术育种领域。本发明首次应用黄瓜线粒体基因组序列开发SSR标记来检测黄瓜杂种一代种子纯度，以期区分母本黄瓜植株上其他花粉来源的假杂交种和自交种，相对于核基因组SSR标记技术对品种鉴定方面的研究，其主要利用黄瓜线粒体父系遗传特性而多了一种新的检测方法，同时为追踪杂交过程中父系/母系线粒体基因组做技术准备。该方法也可以应用于其他父系植物材料杂种一代种子的检测。
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公开(公告)号：CN104593508A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510040811.9
申请日：2015-01-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了黄瓜6号染色体探针制备的方法和应用。它是基于黄瓜基因组序列，通过RepeatMasker软件和黄瓜基因组数据库BLAST分析选取不含重复序列的DNA序列，利用Primer Premier 5.0软件进行引物设计。通过PCR扩增获得覆盖单染色体的PCR产物，将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳纯化，利用核酸浓度测量仪测定浓度后，将每对引物等量的产物进行混池，并用缺刻平移法标记探针，并利用荧光原位杂交技术杂交到染色体制片上，完成单染色体探针的制备和检测应用。通过应用此方法，可以快速获得黄瓜单染色体或者任何染色体区段的探针，可对单染色体或任何染色体的形态结构进行精确的分析研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103852368A
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310396467.8
申请日：2013-09-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明是对黄瓜花粉的树脂半薄切片进行MTG(Mito？Tracker？Green)和DAPI双荧光染色观察的方法，涉及植物组织固定、植物花药Technovit7100树脂半薄切片以及MTG-DAPI双荧光染色，属于生物技术领域。本发明首次观察到黄瓜贴壁期花粉生殖细胞内的线粒体及其包含的DNA，可以用于探索黄瓜花粉发育过程中线粒体数目的变化规律，同时为进一步研究黄瓜线粒体父系遗传的相关机制做基础。该方法也可以应用于其他植物材料中线粒体的观察，用以确定植物材料是否具有线粒体基因组父系遗传或双亲遗传的潜力。
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公开(公告)号：CN103430851A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310409718.1
申请日：2013-09-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及了一种提高黄瓜远缘杂交组培苗驯化成活率的方法，属于生物技术领域，主要用于黄瓜种属间杂交材料的扩繁保存和驯化成苗，为远缘杂交技术在黄瓜育种中的应用提供了一个技术保证。其步骤主要包括：胚拯救获取无菌苗、诱导分化不定芽、再生芽的伸长和生根培养、驯化移栽及在此过程中的特殊配制的培养基及外界环境条件的调控。本方法操作简便，对原材料及实验室设施要求较低，但成效极好，可使远缘杂交组培苗获得更强壮的功能根，且缩短了炼苗周期，提高了移栽成活率，不仅为黄瓜种属间杂交乃至甜瓜属内杂交提供了稳定高效的再生苗驯化体系，而且也可以用于甜瓜属珍惜野生种的保存和扩繁及普通黄瓜组培苗的移栽成苗。
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公开(公告)号：CN103355160A
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201310326103.2
申请日：2013-07-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明甜瓜属种间渐渗系群体构建及其用于黄瓜育种的方法，属于生物技术育种领域。通过野生酸黄瓜和黄瓜种间杂交-回交-自交，结合SSR分子标记辅助选择，成功构建了由86份株系组成的甜瓜属首个种间渐渗系群体。该渐渗系群体包含了覆盖黄瓜全基因组54％的野生酸黄瓜的导入片段，并且通过田间接种鉴定，筛选到抗病性较强的三份资源“IL2”、“IL24”、“IL49”，将其分别与优良栽培黄瓜杂交后又可获得一系列具有较强抗病能力的黄瓜新品系。黄瓜/酸黄瓜种间渐渗系群体不仅拓宽了黄瓜的遗传基础，而且为开发利用野生酸黄瓜的优良基因提供了新的种质资源，也为今后定位黄瓜的重要基因或遗传位点以及功能研究奠定了材料基础。
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公开(公告)号：CN102257953B
公开(公告)日：2013-04-10
申请号：CN201110123037.X
申请日：2011-05-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术育种领域，涉及抗南方根结线虫黄瓜渐渗系材料的培育方法。本发明通过野生种与栽培种的种间杂交，染色体加倍获得双二倍体新种，经回交、自交获得种间渐渗系，再对黄瓜渐渗系利用人工苗期卵液接种法进行鉴定，鉴定结果发现渐渗系10299F-5的病情指数均为2.0，表现为抗病，由此得到抗南方根结线虫病的黄瓜种间杂交渐渗系材料。该抗南方根结线虫病的黄瓜种间杂交渐渗系材料农艺性状优良，可直接作为育种材料，不仅填补了黄瓜抗南方根结线虫资源的空白，还为其它植物的接种鉴定提供参考，而且为今后黄瓜品种的改良、抗病基因转移、基因定位、分子标记、基因克隆等提供了有用的遗传材料。
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公开(公告)号：CN102199598B
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201110081073.4
申请日：2011-03-31
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/11
Abstract: 本发明属于作物遗传育种与生物技术领域，涉及甜瓜抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记。甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记，用SSR标记引物CMAT170a扩增含甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的育种材料或品种DNA，获得的120bp扩增片段即为甜瓜资源PI482398抗蔓枯病基因Gsb-4的SSR标记，该SSR标记与抗性基因的遗传距离为5.14cM。本发明在国际上首次获得1个与甜瓜抗蔓枯病因Gsb-4紧密连锁的SSR分子标记。通过检测该分子标记，可以预测甜瓜植株的蔓枯病抗性，进而快速筛选抗病品种或品系用于甜瓜育种。抗病基因位点检测方便快速，不受环境条件限制。
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