基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法

    公开(公告)号:CN110129349B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201910282838.7

    申请日:2019-04-10

    Abstract: 本发明公开了基于ISApl1插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下:通过AflII和XhoI双酶切pUC19‑tpm质粒和pUC19‑RP4质粒,然后将电泳后回收的产物用连接酶连接,构建pTFX‑RP4质粒;然后通过EcoRI和Spel双酶切pTFX‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒,再将电泳后回收的产物用连接酶连接,构建能表达荧光的自杀型质粒。再进一步将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞,并将获得的荧光标记的大肠杆菌与目标菌株混合培养,可构建荧光菌株。本发明方法效率高、成本低,适用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物。

    基于mariner转座子构建自杀型质粒及耐药突变菌株的方法

    公开(公告)号:CN110079540B

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN201910282837.2

    申请日:2019-04-10

    Abstract: 本发明共公开了一种基于mariner转座子构建自杀型质粒及耐药突变菌株的方法。该自杀型质粒的构建包括如下步骤:以pCat‑marinerr质粒为模板进行PCR扩增,将获得的扩增产物作为质粒骨架;然后以pUC57‑tpm质粒为模板扩增tpm抗性基因,再将质粒骨架和tpm抗性基因进行同源重组,得到所述自杀型质粒。本发明中的耐药突变菌株是将自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞,然后将获得菌株和目标菌株混合培养,再用含有亚碲酸盐的单药板、以及含有亚碲酸盐和原抗性筛选标记药物的双药板进行筛选,得到耐药突变菌株。本发明方法操作简单,可高通量的获得转座突变株,适用于构建耐药菌株或筛选药物。

    大肠杆菌(Escherichia coli)LHM10-1菌株及其应用

    公开(公告)号:CN110055192A

    公开(公告)日:2019-07-26

    申请号:CN201910290884.1

    申请日:2019-04-12

    Abstract: 本发明属于环境污染物生物处理技术领域,具体涉及大肠杆菌(Escherichia coli)LHM10-1菌株及其在降解四环素族抗生素中的应用,大肠杆菌(Escherichia coli)LHM10-1菌株,于2019年3月28日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC),保藏编号为GDMCC No:60622。本发明大肠杆菌LHM10-1菌株对四环素族抗生素具有良好的降解作用。进一步地,本发明提供的大肠杆菌LHM10-1能够在16小时后降解83.91%的四环素和92.24%的伊拉瓦环素,为四环素族抗生素药物的残留问题提供了安全、高效、环保的解决途径。

Patent Agency Ranking