一种数字PCR芯片及其制备方法

    公开(公告)号:CN111196993A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010060136.7

    申请日:2020-01-19

    Abstract: 本发明公开了一种数字PCR芯片,该芯片包括基底层和盖板层,基底层与盖板层之间形成密封腔体,盖板层上设置有至少一个进样孔和至少一个出样孔,基底层上设置有至少一个储液池和至少一个通道,储液池与通道连通,储液池中设置有至少一个微孔。相应的,本发明还公开了一种制备上述数字PCR芯片的方法。本发明芯片集成度高,面积小,通过采用湿法刻蚀工艺和硅-玻璃键合,可以批量制作高通量的数字PCR芯片;通过流体仿真改进芯片结构,可以防止后续进样出现流动死角;进样过程利用矿物油与样品的膨胀系数差异封锁待测样品于微孔中,均匀独立并有助于防止样品污染,便于制作靶基因测试的高通量、高灵敏度、高精度的数字PCR芯片。

    循环肿瘤细胞过滤微流控制装置、其制备工艺及工作方法

    公开(公告)号:CN109517728A

    公开(公告)日:2019-03-26

    申请号:CN201811254463.5

    申请日:2018-10-26

    Abstract: 本发明提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置,包括负压进样泵和微流控制芯片,微流控制芯片包括上层进样层、塑料微孔过滤膜和下层废液层;塑料微孔过滤膜上均匀布置有若干过滤孔;上层进样层连通样本试管中,下层废液层连接在负压进料泵;本发明还提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置的制备工艺,包括以下步骤:上层进样层和下层废液层制备、塑料微孔过滤膜制备、微流控制芯片组装和整体安装;又提供一种循环肿瘤细胞过滤微流控制装置的工作方法,包括以下步骤:制备样本,捕捉肿瘤细胞,加入抗体稀释液,免疫荧光染色观察计数。本发明中将细胞捕获、鉴定集于一体,减少了转移过程中肿瘤细胞细胞的损伤和污染,具有成本低,操作简单等特点。

    一种基于纳米金增强的多种肺癌标志物的高灵敏检测方法

    公开(公告)号:CN102313814B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201110211260.X

    申请日:2011-07-22

    Abstract: 本发明是一种基于纳米金增强的多种肺癌标志物。高灵敏度检测方法,检测步骤为:1)先将各待测蛋白质的捕捉抗体点样到醛基修饰的基片上;2)然后在纳米金上标记上待测蛋白的多克隆或单克隆检测抗体;3)将标记好待测蛋白质捕捉抗体的蛋白芯片及纳米金生物复合探针与待测蛋白质样品混合,37℃孵育一段时间,洗去没有反应的纳米金探针;4)加入金增强反应液,肉眼或显微镜下观察、或用CCD扫描拍照,根据灰度值测定相应的蛋白浓度。本发明提供的方法可广泛应用于临床诊断、肿瘤转移监测、抗原、抗体、核酸的检测、卫生检疫、环境检测等领域,检测蛋白质的灵敏度达pg/ml级。

    基于离心微流控技术的稀少细胞分离检测系统及方法

    公开(公告)号:CN103018224B

    公开(公告)日:2015-07-29

    申请号:CN201210545205.9

    申请日:2012-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种基于离心微流控技术的稀少细胞分离检测系统及方法,所述系统包含一个类似光盘的微流控芯片、一个离心驱动模块和一个光学检测模块。其中微流控芯片包含多组辐射状排列的微管道和微腔,芯片整体结构由弹性微柱导轨层、可变形薄膜层、管道/腔体层、过滤膜层和废液收集层组成。使用时,首先将样品液和免疫修饰的微球通过微流控芯片进样口导入其储液腔中,并将其置于离心驱动模块的离心平台上,装配好弹性微柱,低速旋转,实现储液腔中样品液和免疫修饰的微珠液体的充分混合和反应,然后高速旋转芯片分离;然后在各分离细胞收集区滴加特异识别的荧光标记抗体溶液,温育反应,加入缓冲液并离心;最后,通过光学检测模块进行鉴定和分析。

    基于离心微流控技术的稀少细胞分离检测系统及方法

    公开(公告)号:CN103018224A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210545205.9

    申请日:2012-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种基于离心微流控技术的稀少细胞分离检测系统及方法,所述系统包含一个类似光盘的微流控芯片、一个离心驱动模块和一个光学检测模块。其中微流控芯片包含多组辐射状排列的微管道和微腔,芯片整体结构由弹性微柱导轨层、可变形薄膜层、管道/腔体层、过滤膜层和废液收集层组成。使用时,首先将样品液和免疫修饰的微球通过微流控芯片进样口导入其储液腔中,并将其置于离心驱动模块的离心平台上,装配好弹性微柱,低速旋转,实现储液腔中样品液和免疫修饰的微珠液体的充分混合和反应,然后高速旋转芯片分离;然后在各分离细胞收集区滴加特异识别的荧光标记抗体溶液,温育反应,加入缓冲液并离心;最后,通过光学检测模块进行鉴定和分析。

    纳米复合探针及其用于基因芯片膜转印的检测方法

    公开(公告)号:CN101812529A

    公开(公告)日:2010-08-25

    申请号:CN201010156014.4

    申请日:2010-04-23

    Abstract: 本发明涉及一种纳米复合探针及其在基因芯片膜转印的检测方法,其特征在于所述的纳米复合探针为三条探针共同标记的纳米颗粒,其中所述的三种探针分别为检测探针DP2和两种长短不同的信号探针SP1和SP2,三种探针的长度DP2≥SP1>SP2,且SP1碱基长度比SP2长10mer以上;DP2、SP1和SP2混合的比例为DP2/(SP1+SP2)=1∶5-1∶30,其中SP1与SP2的比例在1∶5-1∶30之间。所述的三条探针共同标记纳米颗粒所形成的空间立体结构降低杂交及生物素——键亲和素反应的空间位阻,提高检测灵敏度。采用杂交和显色的方法用于检测合成靶DNA分子和结核分枝杆菌,具有灵敏度高和探眼可分辨的特点。

    一种纳米金生物复合探针、检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN101545007A

    公开(公告)日:2009-09-30

    申请号:CN200910050299.0

    申请日:2009-04-30

    Abstract: 本发明是一种纳米金生物复合探针、检测方法及其应用,其特征在于首先用待测蛋白质的单克隆抗体标记磁珠,再在纳米金上标记待测蛋白的多克隆抗体的同时还标记一种带有生物素标记的DNA探针,纳米金上的DNA探针再通过生物素-链霉亲和素反应,使镧系元素接到胶体金上构建成纳米金生物复合探针,将标记好待测蛋白质单克隆抗体的磁珠及纳米金生物复合探针与待测蛋白质样品混合,37℃孵育一段时间,洗去没有反应的纳米金探针,加入增强液,测定荧光强度,从而达到对待测蛋白质进行定量测定的目的。使用本发明的方法,可显著提高生物分子的检测灵敏度,且可同时检测多种生物分子。可广泛应用于临床诊断、抗原、抗体、核酸的检测、卫生检疫、环境检测等领域。

    基于磁珠和纳米金探针的微量蛋白质的测定方法

    公开(公告)号:CN101256191A

    公开(公告)日:2008-09-03

    申请号:CN200810034363.1

    申请日:2008-03-07

    Abstract: 本发明涉及一种基于磁珠及纳米金探针的高灵敏度微量蛋白质的测定方法,其特征在于:首先用待测蛋白的单克隆抗体标记磁珠,在纳米金上标记待测蛋白的多克隆抗体,在纳米金上同时还标记一种带有生物素标记的DNA探针,纳米金上的DNA探针通过生物素-链亲和素反应,又标记上了辣根过氧化酶(HRP),组成纳米金探针,将标记好抗体的磁珠及纳米金探针与待测蛋白样品混合,37℃孵育一段时间,然后再洗去没有反应的纳米金探针,用TMB显色系统进行显色,从而达到对待测蛋白进行定量检测的目的。本发明检测时间可缩至1-1.5小时,灵敏度达pg/ml。

    基于纳米金探针的基因芯片的DNA检测方法

    公开(公告)号:CN101182578A

    公开(公告)日:2008-05-21

    申请号:CN200710170613.X

    申请日:2007-11-19

    Abstract: 本发明涉及一种基于纳米金探针的基因芯片的高灵敏度的DNA检测方法,其特征在于首先将纳米金通过低温离心浓缩富集,用无菌去离子水或TE(pH7.4)按一定浓度重悬,再在纳米金里加一定量的巯基修饰的DNA信号探针,大大节约了巯基修饰DNA的用量;标记完后,与待测目的分子一起置于芯片上采用一步法杂交,将待测DNA与芯片上的捕捉探针及标记纳米金的信号探针同时杂交上,杂交完后再进行清洗,晾干,加改进的银染试剂于芯片上进行银染显色,使杂交信号强度大大提高,以提高检测灵敏度,肉眼观测或用CCD扫描拍照。本发明提供的检测方法具有大大降低DNA探针用量、灵敏度高和信号检测方便等优点。

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