用于海绵共附生土曲霉发酵生产(+)-Terrein的人工海水及培养基

    公开(公告)号:CN103497976A

    公开(公告)日:2014-01-08

    申请号:CN201310274691.X

    申请日:2013-07-02

    Abstract: 本发明公开了一种用于海绵共附生土曲霉发酵生产(+)-Terrein的人工海水及培养基;所述人工海水包括如下各组分:蒸馏水、氯化镁、硫酸镁、氯化钾、碳酸氢钠、溴化钠;向海绵共附生土曲霉发酵培养基中添加人工海水,即可促进(+)-Terrein的合成。本发明还涉及用于海绵共附生土曲霉发酵生产(+)-Terrein的培养基,包括如下组分:葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、麦芽提取物、谷氨酸钠、氯化铵,人工海水。本发明较现有人工海水相比,本发明使用含有人工海水的培养基制得(+)-Terrein产量达到6.68g/L,其产量明显提高53.8%,降低了人工海水盐度80%以上,减小了对金属制生物反应器的腐蚀风险。

    大片段海绵宏基因组DNA快速提取方法

    公开(公告)号:CN100398647C

    公开(公告)日:2008-07-02

    申请号:CN200610024278.8

    申请日:2006-03-02

    Inventor: 李志勇 吴杰

    Abstract: 一种大片段海绵宏基因组DNA快速提取方法,无菌条件下用无钙镁人工海水浸泡海绵样品并撕成1-3mm3小块,浸泡使海绵细胞及其共附生微生物分散于溶液中,静置、吸取上层混合细胞悬浮液,加入乙二胺四乙酸、十二烷基肌氨酸钠组成的碱性破壁缓冲液和含Ca2+的蛋白酶K溶液消化细胞壁,采用Tris-饱和酚、氯仿、异戊醇混合溶液以及氯仿、异戊醇混合溶液提取DNA,再加入醋酸钠及异丙醇得到DNA沉淀,70-75%乙醇洗涤、干燥、溶于TE缓冲液,采用RNase酶消解RNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA。本发明简单快捷,适合大于40000个碱基以上的海绵宏基因组DNA提取,可满足宏基因组文库构建和功能基因筛选的需要。

    海绵共附生微生物群落总DNA的快速提取方法

    公开(公告)号:CN1740186A

    公开(公告)日:2006-03-01

    申请号:CN200510029320.0

    申请日:2005-09-01

    Inventor: 李志勇 何丽明

    Abstract: 一种海绵共附生微生物群落总DNA的快速提取方法,先将海绵样品切成小块,悬浮于TE缓冲液中放置冰上直接研磨,完成海绵组织的裂解,然后在得到的TE悬浮海绵裂解物中,加入溶菌酶、十二烷基磺酸纳及蛋白酶K处理,离心后加入Tris-饱和酚抽提,然后依次采用Tris-饱和酚、氯仿、异戊醇溶液及氯仿、异戊醇溶液提取,再依次加入NaCl及异丙醇得到DNA沉淀,洗涤后溶解于TE缓冲液,采用RNA酶消解RNA,最后琼脂糖凝胶电泳分析检测提取的DNA样品。本发明可在一般实验室快速、方便地得到大片段的海绵共附生微生物的群落总DNA样品,可满足基于核酸的海绵共附生微生物种群结构与多样性分析的需要。

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