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公开(公告)号：CN104087624B
公开(公告)日：2017-08-08
申请号：CN201410329786.1
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉连续发酵生产柠檬酸的方法，包括以下步骤：（1）黑曲霉经过逐级扩大培养，获得成熟的孢子；（2）孢子液接种至种子培养基，培养成为成熟的种子液；（3）成熟的种子液转接至发酵培养基F1；（4）发酵培养后，分割发酵液为两部分；其中一部分发酵液继续发酵完毕，获得柠檬酸；（5）分割出的另一部分发酵液经分散器分散处理，获得分散菌丝的发酵液；（6）将分散菌丝发酵液接入发酵培养基F2；发酵培养后，回到步骤（4），如此重复实现连续发酵。本发明显著降低生产成本与运行成本，显著缩短生产周期，提高生产效率；同时提高设备利用率，降低劳动强度，过程简便易操作，可以广泛应用于柠檬酸的生产。
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公开(公告)号：CN104789635B
公开(公告)日：2017-05-03
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度‑时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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公开(公告)号：CN106479912A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610812192.5
申请日：2016-09-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株产纤维素酶的地衣芽孢杆菌，以及包含该地衣芽孢杆菌的微生态制剂、该微生态制剂在促进秸秆腐熟中的应用，属于微生物技术领域。该菌种已于2016年4月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号是CCTCC No.M 2016202，其采用液态发酵、离心、喷雾干燥工艺获得单菌粉，与枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、凝结芽孢杆菌CCTCC No.M 2015273、黑曲霉按一定比例混合，并添加辅料从而制得秸秆腐熟剂。本发明添加了地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2016202的秸秆腐熟剂能原位降解农作物秸秆、促进秸秆还田，尤其在秋冬季节温度较低的条件下仍能发挥作用。
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公开(公告)号：CN106467419A
公开(公告)日：2017-03-01
申请号：CN201610812131.9
申请日：2016-09-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生物有机肥的制备方法，将禽畜粪便、秸秆混匀之后拌入微生物菌剂，堆置发酵，至彻底腐熟之后进行干燥、造粒，从而得到生物有机肥成品。其中所使用的微生物菌剂由微生物单菌粉及辅料组成，微生物单菌粉包括地衣芽孢杆菌CCTCC No.M 2016202、枯草芽孢杆菌CCTCC No.M 2011443、凝结芽孢杆菌CCTCC No.M 2015273、黑曲霉、酿酒酵母。所得生物有机肥产品有效期长达12个月以上，远超过现行生物有机肥标准NY 884-2012所规定的不低于6个月；有机肥生产厂家可以在需求淡季进行制备、仓储来满足旺季需求，不需要在短时间内满负荷甚至超负荷运转，有利于平稳生产。
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公开(公告)号：CN104818304A
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201510284722.9
申请日：2015-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种重组L-苯甘氨酸转氨酶蛋白在催化苯乙酮酸到L-苯甘氨酸的反应中的应用，所述重组L-苯甘氨酸转氨酶蛋白来自于东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis CGMCC 4.1286)，以L-苯丙氨酸为最适氨基供体。本发明得到的L-苯甘氨酸转氨酶HpgT具有L-苯甘氨酸转氨酶活力，能够以L-苯丙氨酸为最适的氨基供体，能够高效催化苯乙酮酸生成L-苯甘氨酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104789635A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510224891.3
申请日：2015-05-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法：(1)取培养成熟的黑曲霉麸曲孢子，用磷酸缓冲液清洗，过滤，获得黑曲霉麸曲孢子悬液；(2)添加0.05％(v/v)的吐温80，超声波处理，获得分散均匀的单孢子悬液，调节孢子悬液浓度为106～107个/mL；(3)用磷酸缓冲液配置8～14mg/L浓度的亚甲基蓝溶液；(4)将步骤(2)与(3)的溶液按照v/v为1:1的比例于比色皿中混合均匀密封，反应420s，于663nm波长处扫描吸光度-时间曲线；(5)测定反应体系初始与反应结束的吸光度，以吸光度的变化表征细胞活力大小。本发明可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率；其它微生物孢子活力评价，均适用本技术。
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公开(公告)号：CN104630257A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510004921.X
申请日：2015-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Spathaspora passalidarum的表达系统，包括一种新型表达载体，其为环状，从5’-3’依次可操作性地连接有以下元件：pMD19-Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；所述筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。所述能够利用木糖的酵母为Spathaspora passalidarum。本发明的表达载体可实现在Spathaspora passalidarum中的整合型稳定表达，对木糖利用酵母Spathaspora passalidarum的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN104561082A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201510006229.0
申请日：2015-01-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株能够利用木糖的酵母Candida jeffriesii的表达系统，包括一种表达载体，从5’-3’依次可操作性地连接有以下元件：pMD19-Tsimple质粒骨架、rDNA同源重组序列、外源基因表达盒和筛选标记基因表达盒；外源基因表达盒自上游至下游依次包括启动子、外源基因插入酶切位点以及转录终止子；筛选标记基因表达盒包括启动子、抗生素抗性基因、转录终止子。本发明的表达载体可实现在Candida jeffriesii中的整合型稳定表达，对木糖利用酵母Candida jeffriesii的基础理论研究及产品开发具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN104099253A
公开(公告)日：2014-10-15
申请号：CN201410329652.X
申请日：2014-07-11
Applicant: 江南大学 , 宜兴协联生物化学有限公司
Abstract: 一种基于菌丝球分散技术的柠檬酸黑曲霉种子连续培养方法，包括以下步骤：（1）将黑曲霉孢子液接种至种子培养基，培养制备成熟的种子液；（2）成熟的种子液经过分散器处理，得到分散菌丝种子液；（3）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量转接至发酵培养基发酵，当发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时发酵结束；（4）将步骤（2）得到的部分分散菌丝种子液以5~15%接种量接种至种子培养基，培养制备得到下一级成熟的种子液，然后回到步骤（2），即实现黑曲霉种子连续培养。本发明提供的黑曲霉种子连续培养方法，能直接减少黑曲霉孢子繁琐的培养过程，同时可以有效缩短成熟种子培养时间，提高原料利用率。
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公开(公告)号：CN115976121B
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202310084310.5
申请日：2023-02-08
Applicant: 江苏国信协联能源有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种残糖回收的膜分离黑曲霉菌体循环连续发酵生产柠檬酸的方法。本发明所述方法为：将黑曲霉种子液接入发酵培养基，发酵培养生产柠檬酸；当柠檬酸浓度达到一定浓度后，开启循环泵，利用膜组件从发酵罐连续分离出含柠檬酸的膜分离液，同时以相同速度向发酵罐内连续流加补料基质，使发酵液体积保持平衡；从膜分离液中提取柠檬酸；向剩余提取废液中加入普鲁兰酶酶解后，再加入葡萄糖，配制成葡萄糖溶液作为补料基质，重新流加至发酵罐。本发明通过膜分离技术使发酵过程产物分离和菌体截留，实现了黑曲霉菌体循环连续发酵；利用提取废液配制补料基质重新流加至发酵罐，实现了残糖回收。
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