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公开(公告)号：CN101899427B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910235185.3
申请日：2009-11-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/20
Abstract: 通过定向进化构建的活力提高的脂肪酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了一种由华根霉(Rhizopus chinensis)CCTCC M 201021脂肪酶基因经定向进化而获得的一系列脂肪酶突变体。在各突变体的氨基酸序列中，涉及到的氨基酸突变为Ala129Ser、Lys161Arg、Thr195Tyr、Ala230Thr、Val261Gly、Lys322Arg、Ser373Asn以及上述氨基酸两个、三个或四个突变的组合。以转换数Kcat表示，这些突变体的酶活较出发菌株得到了提高。
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公开(公告)号：CN101550605B
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN200910027625.6
申请日：2009-05-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种基于体内同源重组构建酵母整合型基因突变文库的方法，属于蛋白质工程，分子生物学技术，基因工程领域。本发明方法为：构建目标基因的重组表达质粒；以此为模版，设计长引物片段，易错PCR扩增得到两端带有表达载体20～70bp同源序列的突变基因；分别对表达载体的与突变基因两端同源区域以及与基因组同源区域进行酶切线性化；将易错PCR扩增产物与线性化后的表达载体以一定的摩尔比混合电转化酵母，通过同源重组，外源突变目标基因整合入酵母基因组，获得基因突变文库。本方法效率高，操作方便，建库周期由1～2周缩短为3天，建库不需要任何亚克隆步骤，降低了突变基因容量与丰度的损失，具有通用性，可用于各种能在酵母中表达的目标基因。
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公开(公告)号：CN102093182A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201010576050.6
申请日：2011-02-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种常温下空气氧化香茅醇高效制备香茅醛的方法，属于香茅醛制备技术领域。本发明以香茅醇为原料，在常温空气条件下，依次加入催化剂、助催化剂1、助催化剂2和助催化剂3，催化氧化得到香茅醛。本发明制备香茅醛的反应条件温和，操作简单，催化剂便宜易得，产率高，有较高的工业化应用价值。
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公开(公告)号：CN101575273A
公开(公告)日：2009-11-11
申请号：CN200910033301.3
申请日：2009-06-17
Applicant: 江南大学
IPC: C07C47/21 , C07C45/56 , B01J31/02 , B01J23/72 , B01J27/122 , B01J27/128 , C11B9/00 , A23L1/226 , C11D3/50
Abstract: 一种二氢月桂烯制备香茅醛的方法，属于香茅醛制备技术领域。本发明以金属硼氢化合物、丙二酸和二氢月桂烯为原料，在氮气保护下，制备有机硼化合物，然后采用一锅法在氢氧化钠、H2O2、催化剂、助催化剂1和助催化剂2存在下将有机硼化合物直接催化氧化制备香茅醛。本发明方法反应选择性好，条件温和，操作简便，容易实现工业化生产；与现有香茅醛合成技术相比，原料二氢月桂烯丰富易得、工艺路线简单，可大幅降低香茅醛的制备成本。
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公开(公告)号：CN113735941B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202110930293.3
申请日：2021-08-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蛋白纯化方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明设计了一种新型的内含肽，该内含肽含有两个部分，分别为连接聚集标签的N端(IN)和连接目的蛋白的C端(IC)，当两者混合之后，在适当的条件下发生切割反应，获得目的蛋白，而内含肽与聚集标签发生聚集反应，留在沉淀中，可通过离心去除。本发明的新型内含肽具有较高的切割效率，而且能够通过调节pH值控制切割率，实现在3个小时就可完成切割，并且当pH6.0时最高切割率达到98％；本发明将新型内含肽与聚集标签相结合，对目的蛋白(56)对比文件Yamin Fan等《.Column-Free PurificationMethods for Recombinant Proteins UsingSelf-Cleaving Aggregating Tags》《.Polymers(Basel)》.2018,第10卷(第5期),Merideth A Cooper等《.A ConvenientSplit-Intein Tag Method for thePurification of Tagless Target Proteins》.《Current Protocols in Protein Science》.2018,第91卷Adam J Stevens等《.Design of a SplitIntein with Exceptional Protein SplicingActivity》《.Journal of the AmericanChemical Society》.2016,第138卷(第7期),杜夜星等《.断裂内含肽介导的亲和介质与亲和标签的应用》《.高校化学工程学报》.2020,第34卷(第2期),
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113862242A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111204677.3
申请日：2021-10-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种减弱液泡分选提高里氏木霉纤维素酶产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过敲除液泡分选途径相关基因vps10，vps13以及vps21，减弱了纤维素酶分泌过程中向液泡的错误转运，进而提升了里氏木霉中纤维素酶的产量。在纤维素诱导条件下，缺失菌株Δvps10，Δvps13以及Δvps21的胞外蛋白以及纤维素酶酶活都有不同程度的提升，将发酵液用于生物质降解可使葡萄糖得率较亲本获得5.6％，18.5％和17.7％提升，表明Δvps10，Δvps13以及Δvps21生产的纤维素酶能够对生物质进行更好的分解，产生更多的葡萄糖，具有更好的应用价值。
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公开(公告)号：CN111117981B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201911353179.8
申请日：2019-05-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用，属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好，因此，本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。
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公开(公告)号：CN110951712B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201911352617.9
申请日：2019-05-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用，属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好，因此，本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。
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公开(公告)号：CN110904073B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201911352620.0
申请日：2019-05-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用，属于酶工程技术领域。本发明脂肪酶突变体的热稳定性好、pH稳定性好、洗涤性能好，因此，本发明的脂肪酶突变体在去污、油脂加工、乳品加工、面食加工、肉类加工、药物合成、柴油合成、高分子合成、手性化合物合成、皮革生产、制备洗涤剂和造纸等方面均有很重要的应用。
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公开(公告)号：CN108034647B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201810095366.X
申请日：2018-01-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种饱和脂肪酸特异性脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明根据华根霉脂肪酶(RCL)结构分析，对其进行定点突变，获得了脂肪酸特异性改变的突变酶。比较野生型脂肪酶与突变酶催化水解动物油的能力，得到了水解率远高于野生型脂肪酶的突变酶。相比野生型RCL，突变酶T286Q、I281F和A116W/I281F由于增强了对饱和脂肪酸的特异性，其对猪油水解率分别由55％提高到了85％、90％和86％。
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