一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法

    公开(公告)号:CN110196219A

    公开(公告)日:2019-09-03

    申请号:CN201910405117.0

    申请日:2019-05-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于流式细胞术检测鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用的方法,包括如下步骤:(1)细菌培养,所述的细菌为鸡白痢沙门菌S06004和S06004ΔspiC;(2)鸡的免疫及采样;(3)靶细胞—巨噬细胞的制备;(4)效应细胞—鸡脾脏CD8+T细胞的制备:包括鸡脾脏淋巴细胞悬液的制备步骤和磁珠分选鸡脾脏CD8+T细胞的步骤;(5)CTL特异性杀伤巨噬细胞。相对于现有技术,本发明具有如下有益效果:本发明贴壁获得的巨噬细胞(靶细胞)纯度较高,且鸡脾脏CD8+T细胞分选效果明显,分离时间短;以沙门菌宿主细胞—巨噬细胞作为靶细胞,可更精确反映宿主对沙门菌的清除能力;将流式细胞术用于鸡脾脏CD8+T细胞特异性杀伤作用,可在单细胞水平检测鸡脾脏CD8+T细胞的CTL效应。

    一种用于罗森沙门菌的CRISPRs子分型检测试剂盒

    公开(公告)号:CN107267609A

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201710470366.9

    申请日:2017-06-20

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/686 C12Q2525/151

    Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种用于罗森沙门菌(S.Rissen)的CRISPRs子分型检测试剂盒。本发明的试剂盒及分型方法的分辨力高于MLST方法,且一株沙门菌只需要扩增2种产物,而MLST要扩增7种产物。较于被誉为“金标准”的PFGE,其快速高通量的优点得以凸显,大量样品的子分型仅仅需要2-3天,而PFGE只能在3天时间内完成12株样品的子分型,耗时耗力,且需要专业人员操作。并且,本发明方法对分离自不同时间和地区的分离株有一定的区分度,还可以将亲缘关系相近的分离株进行聚类,这为沙门菌流行病学调查提供了技术支持。

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