一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺

    公开(公告)号:CN106399321A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610743781.2

    申请日:2016-08-27

    Abstract: 本发明公开了一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺,其包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成该鸡α干扰素基因;S2、根据密码子优化后的鸡α干扰素基因,设计三条特异性的引物;S3、构建含ProS2促溶标签的重组鸡α干扰素质粒;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组鸡α干扰素的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过细胞病变抑制法测出了该干扰素具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到7.32×107UI/mg。

    一种快速检测鸡伤寒沙门氏菌的PCR-HRM引物及其应用

    公开(公告)号:CN105296636A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510755751.9

    申请日:2015-11-06

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q2527/107 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开一种快速检测鸡伤寒沙门氏菌的PCR-HRM引物及其应用。本发明首次建立了一种快速检测鸡伤寒沙门氏菌的PCR-HRM引物并应用,其操作方便,检测时只需要在PCR反应中加入饱和荧光染料;简化了临床检验的流程并大大缩短了检测时间;且该方法具有高通量、低成本的特点。本发明从PCR过程到HRM分析实现了真正的闭管操作,整个过程PCR产物无需再转入其他装置,避免了交叉污染,并且可以完成定量分析。本发明特异性强,能够很好的区分鸡伤寒沙门氏菌,解决了传统检测方法鉴别鸡伤寒沙门氏菌准确率低的问题。本发明灵敏度高,最低检测下限能达到42个拷贝数每微升。在鸡伤寒沙门氏菌的快速诊断中展示了广阔的应用前景。

    一种快速检测鸡白痢沙门氏菌的PCR-HRM引物及其应用

    公开(公告)号:CN105296635A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510755730.7

    申请日:2015-11-06

    Abstract: 本发明公开一种快速检测鸡白痢沙门氏菌的PCR-HRM引物及其应用。本发明首次建立了一种快速检测鸡白痢沙门氏菌的PCR-HRM引物并应用,该方法具有操作简单、快速、特异性强、灵敏度高且高通量、低成本的特点,能够广泛的应用于兽医临床检测,为养殖厂鸡白痢沙门氏菌的净化提供快速、高效的方法。检测时只需要在PCR反应中加入饱和荧光染料;简化了临床检验的流程并且大大缩短了检测时间,与传统国标鉴定方法相比时间节省了2/3。能够很好的区分鸡白痢沙门氏菌,解决了传统检测方法鉴别鸡白痢沙门氏菌准确率低的问题。本发明灵敏度高,最低检测下限能达到34个拷贝数每微升。在鸡白痢沙门氏菌的快速诊断中展示了广阔的应用前景。

    一种基于DNA水平的高致病性猪蓝耳病病毒JEV复制子疫苗及其应用

    公开(公告)号:CN102247606B

    公开(公告)日:2014-07-09

    申请号:CN201110135690.8

    申请日:2011-05-25

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNA水平的高致病性猪蓝耳病病毒JEV复制子疫苗及其应用。本发明是通过引物扩增出高致病性猪蓝耳病病毒XH株的GP5和M基因,利用融合PCR的方法,在两个基因中间插入FMDV-2A的序列,从而得到G-2A-M片段,最后通过SpeI和SalI两个酶切位点克隆到JpJEV-REP;另外,为了使M蛋白能够产生真实的N末端,G-2A-M片段的下游插入了IRES序列(G-2A-M-IRES),最后利用SalI-HF和SpeI两个酶切位点插入到pJEV-REP中,最终构建基于JEV复制子并且能够表达GP5和M蛋白的高致病性蓝耳病疫苗。

    柴胡皂苷a在制备预防和治疗人及动物流感药物的用途

    公开(公告)号:CN103768084A

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201410035562.X

    申请日:2014-01-24

    CPC classification number: A61K31/7048

    Abstract: 本发明公开了柴胡皂苷a在制备预防和治疗人及动物流感药物的用途。药理试验表明,从中药柴胡中分离的柴胡皂苷a可以明显抑制流感及禽流感病毒在体内外的增殖,保护感染流感及禽流感病毒的小鼠,可用于制备防治人及动物流感的药物。本发明柴胡皂苷a用于制备预防和治疗人及动物流感药物,药效成分及作用机制明确,质量可控,安全无毒、疗效稳定;且有效成分柴胡皂苷a主要通过调节宿主细胞的炎症信号通路发挥作用,因此不易导致流感病毒株产生耐药性。

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