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公开(公告)号:CN105331740B
公开(公告)日:2018-08-21
申请号:CN201510770565.2
申请日:2015-11-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型的PCR‑HRM引物和方法,该方法首先构建了DHAV‑1和DHAV‑3相应目的片段的质粒样品作为阳性质粒,然后从样品中提取病毒RNA并反转录为cDNA,再以cDNA为模板,利用所设计的特异性引物对cDNA进行PCR‑HRM扩增;对扩增产物进行HRM分析,确定病毒类型。本发明操作简单,只需在普通PCR反应之前加入荧光饱和染料;检测快速且高通量,整个操作过程需约3.5小时,即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;费用低,不需要多条引物和特异性探针;敏感性高、特异性和重复性好,有利于在临床上的推广应用。
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公开(公告)号:CN107937615A
公开(公告)日:2018-04-20
申请号:CN201711402234.9
申请日:2017-12-20
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了用于区分猪乙型脑炎病毒野毒株和疫苗株的方法以及相应的引物和探针。本发明首次建立了一种可快速区分五种不同基因型JEV野毒株(I、II、III、IV、V)与疫苗株SA14-14-2的荧光PCR检测方法,该检测方法操作简单,全部操作过程不需3小时,不需要病毒的细胞培养,显著缩短了病毒五种不同基因型野毒株与疫苗株鉴别与检测所需时间,并且准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN106048079A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610296853.3
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61的双色荧光检测方法、引物及探针。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线Tm值差异鉴定猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61;操作简单:只需一个反应即可实现两个基因型及疫苗株Bartha‑K61的鉴别检测;检测速度快且高通量:全部操作过程可在3小时内完成,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61鉴别检测所需时间;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN103952413B
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201410203742.4
申请日:2014-05-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/64
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了靶向IFNAR2基因的RNA干扰表达载体构建及应用。本发明的方法是将筛选得到的靶向IFNAR2基因的siRNA寡核苷酸片段插入到载体系统中,构建成靶向IFNAR2基因的RNA干扰质粒载体。实验表明,本发明构建的表达载体可以在ST细胞中高效表达特异的siRNA序列,且该序列能够结合IFNAR2基因的mRNA,使IFNAR2基因的表达量显著降低,达到抑制IFNAR2基因表达的目的。为进一步研究IFNAR2基因的生物学功能提供更加可靠和便捷的研究手段,同时为研究IFNAR2受体在病毒感染中的作用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104004857B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201410229142.5
申请日:2014-05-27
Applicant: 广州博至生物科技有限公司 , 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分不同基因型犬细小病毒的PCR-HRM引物和方法,该方法为先从样品中提取病毒DNA;以病毒DNA为模板,利用所设计的特异性引物对和荧光饱和染料进行扩增反应获得扩增产物;最后对扩增产物进行HRM分析,确定犬细小病毒的基因型。本发明操作简单,只需PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性探针,每个样品的饱和染料成本为1.6RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN103866048B
公开(公告)日:2015-09-23
申请号:CN201410069519.5
申请日:2014-02-27
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种番鸭细小病毒和鹅细小病毒的HRM鉴别方法、试剂盒和引物组,所述检测方法包括如下步骤:(1)设计一组可同时扩增番鸭细小病毒和鹅细小病毒的通用PCR引物;(2)从待测样品中提取病毒基因组DNA作为模板DNA;(3)利用步骤(1)的引物组对模板DNA进行PCR扩增;(4)对扩增产物进行HRM分析,鉴别MDPV和GPV。本发明方法:可快速、有效鉴别MDPV和GPV;检测速度快且高通量:5~10分钟即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;对PCR产物无损害,检测后还可以进行后续分析,如测序和凝胶电泳等。
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公开(公告)号:CN103952413A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410203742.4
申请日:2014-05-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/64
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了靶向IFNAR2基因的RNA干扰表达载体构建及应用。本发明的方法是将筛选得到的靶向IFNAR2基因的siRNA寡核苷酸片段插入到载体系统中,构建成靶向IFNAR2基因的RNA干扰质粒载体。实验表明,本发明构建的表达载体可以在ST细胞中高效表达特异的siRNA序列,且该序列能够结合IFNAR2基因的mRNA,使IFNAR2基因的表达量显著降低,达到抑制IFNAR2基因表达的目的。为进一步研究IFNAR2基因的生物学功能提供更加可靠和便捷的研究手段,同时为研究IFNAR2受体在病毒感染中的作用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN118108838A
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410515685.7
申请日:2024-04-26
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: C07K16/10 , C07K16/06 , C07K14/165 , C12N15/70
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种基于猪德尔塔冠状病毒N蛋白的多克隆抗体,采用氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的N蛋白免疫雌性新西兰大白兔;免疫三次,第三次免疫后14天对雌性新西兰大白兔进行心脏采血分离,得到兔源多克隆抗体。该多克隆抗体具有超高效价,最大效价可达到4,096,000。
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公开(公告)号:CN116904667B
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202311144718.3
申请日:2023-09-06
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 法。本发明属于生物技术领域,公开了一种引物组和探针,包含核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1‑6所示的FIP、BIP、F3、B3、LoopF和LoopB组成的引物组以及如SEQ ID NO:7‑8所示的荧光探针probe和淬灭探针Quencher,该引物组能够对猪流行性腹泻病毒野毒株、疫苗株均进行扩增,对于野毒株的ORF3基因保守区域开发出荧光引物,用于进行荧光的特征性反应,实现了对猪流行性
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公开(公告)号:CN115927211A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202211552173.5
申请日:2022-12-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明涉及细胞培养改良。本发明描述在哺乳动物细胞培养物中生产猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗原的改进方法和组合物。此外,本发明提供改良细胞培养基,包括改良生产培养基、补料溶液和组合补料,其可用于提高哺乳动物细胞PEDV的增殖效率。
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