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公开(公告)号:CN102154476B
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201110032956.6
申请日:2011-01-31
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测方法及其应用”,属生物技术领域。一种香蕉穿孔线虫特异性的循环恒温扩增(LAMP)检测方法,其反应体系中香蕉穿孔线虫特异性LAMP检测引物RSF3、RSB3、RSFIP、RSBIP和RSLF,通过对罹病植物组织中香蕉穿孔线虫或单头香蕉穿孔线虫DNA提取,LAMP等温扩增,从而快速和特异性检测香蕉穿孔线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在香蕉穿孔线虫现场快速检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN103103285B
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310053055.4
申请日:2013-02-18
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据菲利普孢囊线虫RAPD特异性片段序列,设计筛选出6条LAMP引物HF11-F3、HF11-B3、HF11-FIP、HF11-BIP、HF11-LB和HF11-LF,通过提取菲利普孢囊线虫基因组DNA,环介导等温扩增体系建立及其优化、扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出菲利普孢囊线虫。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在菲利普孢囊线虫快速检测和菲利普孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN102690825B
公开(公告)日:2013-07-03
申请号:CN201210200468.6
申请日:2012-06-14
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明为豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法,属生物技术领域。豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,其具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据该豌豆孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HgoF1和HgoR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测豌豆孢囊线虫的方法中,可扩增出544bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在豌豆孢囊线虫检测以及豌豆孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN103103285A
公开(公告)日:2013-05-15
申请号:CN201310053055.4
申请日:2013-02-18
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种菲利普孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据菲利普孢囊线虫RAPD特异性片段序列,设计筛选出6条LAMP引物HF11-F3、HF11-B3、HF11-FIP、HF11-BIP、HF11-LB和HF11-LF,通过提取菲利普孢囊线虫基因组DNA,环介导等温扩增体系建立及其优化、扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出菲利普孢囊线虫。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在菲利普孢囊线虫快速检测和菲利普孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN102690825A
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201210200468.6
申请日:2012-06-14
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明为“豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记和SCAR标记快速分子检测方法”,属生物技术领域。豌豆孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,其具有如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据该豌豆孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HgoF1和HgoR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测豌豆孢囊线虫的方法中,可扩增出544bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在豌豆孢囊线虫检测以及豌豆孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN102690824A
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201210200140.4
申请日:2012-06-14
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及旱稻孢囊线虫特异性RAPD和SCAR标记快速分子检测方法,属生物技术领域。旱稻孢囊线虫特异性RAPD标记的DNA片段,具其如SEQ ID NO1所示的核苷酸序列。根据旱稻孢囊线虫特异性RAPD扩增片段,设计特异性引物HeF1和HeR1,将其转化为更加稳定的SCAR标记片段,在SCAR标记快速分子检测旱稻孢囊线虫的方法中,可扩增出434bp的特异性片段。本发明提高了分子检测灵敏度并且快速准确,在旱稻孢囊线虫检测以及旱稻孢囊线虫病的早期诊断方面,具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN102382819A
公开(公告)日:2012-03-21
申请号:CN201110340265.2
申请日:2010-02-25
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明“一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液、提取方法及其应用”,涉及植物病害的分子生物学检测技术。所述DNA提取液其组分及各组分的终浓度如下:Tris-HCl 200mM,pH 8.0;NaCl 400mM;EDTA 10mM,pH 8.0;CTAB 3%(W/V);β-巯基乙醇4%(V/V)。该提取液作为罹病植物香蕉穿孔线虫DNA的裂解液,能够将感染植物组织的极少量的香蕉穿孔线虫的DNA完好地提取出来,而不受植物组织的酚类、蛋白酶类、解酶等物质的降解。本发明提供的DNA提取液及提取方法是采用PCR等分子生物学手段早期监测香蕉穿孔线虫感染以便于早期治理预防感染的重要基础。
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公开(公告)号:CN117802151A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202410018969.5
申请日:2024-01-05
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明公开了水稻根结线虫感病基因OsThil在调控水稻对根结线虫的抗性方面的应用,属于生物技术领域。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和基因过表达技术,通过农杆菌介导的突变体体系,分别在水稻中定点突变和过表达感病基因OsThil,并转化水稻外植体后分别获得OsThil基因功能缺失和OsThil基因表达量增加的水稻突变体植株,其中OsThil基因功能缺失的突变株可显著增强水稻对根结线虫的抗性。利用本发明公开的OsThil基因构建该基因缺失突变体,有利于提高农作物品种抵抗病原物侵染的能力,对作物的种植范围扩大以及作物产量的提升具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114410803B
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202210110189.4
申请日:2022-01-29
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所 , 陕西省生物农业研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鳞球茎线虫的引物、试剂盒及应用,属于植物线虫分子检测技术领域。所述引物为特异性引物Dp‑482F和Dp‑829R,其核苷酸序列如下:Dp‑482F:5’‑GCTGCGTTGAAGAGAACTGGCAC‑3’,Dp‑829R:5’‑CGGAAAAGCACCCAACCAGTACC‑3’,该引物能特异性检测鳞球茎线虫;本发明还利用该特异性引物构建了检测鳞球茎线虫的方法,该特异性引物和方法的检测阈值高达10pg/μL基因组DNA和1/128头线虫。因此,本发明的引物灵敏度高,特异性强,在鳞球茎线虫的早期诊断和快速检测和预警等方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN114891083A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210448128.9
申请日:2022-04-26
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01N63/60 , A01P5/00
Abstract: 本发明公开了甜菜孢囊线虫Hs8H07蛋白、编码基因及其应用,涉及生物技术领域。所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明还提供一种编码该蛋白的基因。本发明提供的编码该蛋白的基因Hs8H07,在甜菜孢囊线虫食道腺表达;亚细胞定位实验结果表明Hs8H07蛋白定位于烟草叶片细胞的细胞核和细胞膜上。利用寄主介导的RNAi沉默处理沉默Hs8H07基因后,甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比,显著降低。而在拟南芥中过表达Hs8H07基因,甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比,显著增加。表明该基因在甜菜孢囊线虫寄生致病过程中具有重要作用,可作为植物抗线虫工程的靶标基因。
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