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公开(公告)号：CN103805620B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310715572.3
申请日：2013-12-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种无抗生素四价抗病虫和除草剂植物表达载体及应用。所述载体的T-DNA区结构为：右边界-35S启动子-正向双价抗病序列-内含子-反向双价抗病序列-OCS终止子-Ubi启动子-抗虫基因-NOS终止子-NOS启动子-抗除草剂基因-NOS终止子-左边界，T-DNA区左右边界内无抗生素基因，其中正向双价抗病序列即甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒双价干扰序列，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。得到的植物表达载体可用于转化获得同时具有4种抗性的转基因作物，并且获得的转基因作物没有抗生素抗性基因，可提高转基因作物的安全性。并且同一次转化中可获得同时具有4种抗性的转基因作物，与单一抗性的遗传转化相比，可以提高效率3倍以。
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公开(公告)号：CN103966234B
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201410197759.3
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供的是一种甘蔗花青素调节基因ScRS及其应用，属于生物技术领域，调节基因ScRS序列如SEQ ID NO.1所示，根据玉米花青素转录因子RS基因序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScRS的全长序列。甘蔗ScRS基因开放读码框长度为1722bp，编码573个氨基酸。与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为花青素有关的基因。在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为亮紫红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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公开(公告)号：CN103966234A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410197759.3
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供的是一种甘蔗花青素调节基因ScRS及其应用，属于生物技术领域，调节基因ScRS序列如SEQ ID NO.1所示，根据玉米花青素转录因子RS基因序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScRS的全长序列。甘蔗ScRS基因开放读码框长度为1722bp，编码573个氨基酸。与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为花青素有关的基因。在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为亮紫红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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公开(公告)号：CN103966233A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410197758.9
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种甘蔗愈伤组织显色控制基因ScSN及其应用，根据玉米花青素转录因子基因SN（GenBank:X60706.1）的上游、下游序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScSN的全长序列。甘蔗ScSN基因开放读码框长度为1722bp，编码573个氨基酸。将甘蔗ScSN基因的编码区序列在NCBI中进行BLAST分析，与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为甘蔗花青素合成相关基因。在ScSN序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScSN，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为暗红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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公开(公告)号：CN103409412A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310292810.4
申请日：2013-07-12
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因异戊二烯基二磷酸δ-异构酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScIDI2-F和ScIDI2-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明是为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102311954B
公开(公告)日：2013-02-27
申请号：CN201110316550.0
申请日：2011-10-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供了一种转基因番木瓜55-1转化事件特异性PCR检测方法，首先涉及一种转基因番木瓜55-1转化事件外源插入载体旁侧DNA片段，其碱基序列如SEQ.NO.1所示，由来源于番木瓜基因组序列的第1至1432碱基和来源于外源载体序列的第1433至3780个碱基共同组成。根据SEQNO.1所示的序列设计特异性引物，对待测样品DNA进行扩增，若扩增获得目的片段，则待测样品含有转基因番木瓜55-1转化事件来源的成分。本发明能够利用普通的PCR仪器、试剂快速准确鉴别出转基因番木瓜55-1，适用于对转基因番木瓜55-1（包括杂种F1代和后代）及其衍生产品进行检测、监测和标识制度管理。
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公开(公告)号：CN102312016B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201110316557.2
申请日：2011-10-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗宿根矮化病菌的引物及探针，所述的引物为以下序列的引物对：正向引物序列5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’，反向引物序列5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’，探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA。以上面提供的引物对与探针在实时荧光定量PCR仪中检测甘蔗中感染的宿根矮化病菌Pat1基因。通过PCR扩增过程生成的Ct值，利用已经建好的标准曲线将Ct值转换成起始反应的核酸分子拷贝数，从而达到定量检测甘蔗中感染宿根矮化病菌的数量。该方法可应用于甘蔗健康种苗检测、甘蔗抗性鉴定方面。
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公开(公告)号：CN102312016A
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN201110316557.2
申请日：2011-10-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗宿根矮化病菌的引物及探针，所述的引物为以下序列的引物对：正向引物序列5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’，反向引物序列5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’，探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA。以上面提供的引物对与探针在实时荧光定量PCR仪中检测甘蔗中感染的宿根矮化病菌Pat1基因。通过PCR扩增过程生成的Ct值，利用已经建好的标准曲线将Ct值转换成起始反应的核酸分子拷贝数，从而达到定量检测甘蔗中感染宿根矮化病菌的数量。该方法可应用于甘蔗健康种苗检测、甘蔗抗性鉴定方面。
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公开(公告)号：CN101899435A
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN201010265842.1
申请日：2010-08-30
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种利用球磨机高通量提取甘蔗叶片基因组的方法，是针对甘蔗的特殊性利用球磨机对其叶片基因组DNA进行分离的技术。利用球磨机改变磁场使金属珠子一次对多个甘蔗叶片样品进行研磨的特点，优化了钢珠直径、液氮预处理时间、叶片用量、研磨时间等参数，建立了一种适合大批量提取甘蔗叶片基因组的方法。方法的主要步骤包括取样、预冻、研磨、化学抽提等步骤。该方法克服了目前制备甘蔗基因组DNA存在的磨样费时费力、操作繁琐、叶片用量大、交叉污染率高、效率低等缺点，具有适用范围广，简便快速、污染率低、取样量少等优点，特别适宜于大批量快速制备甘蔗叶片基因组。
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公开(公告)号：CN101560493A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910111896.X
申请日：2009-06-03
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及一种提高甘蔗愈伤组织繁殖系数的方法，具体是通过添加一定体积的椰乳大幅度提高甘蔗愈伤组织的分化率和培育壮苗。该发明的设计方案是：将处理过的甘蔗茎尖心叶经过诱导产生愈伤组织后，在分化阶段往培养基中添加5％～20％体积的椰乳，可以极显著地提高愈伤组织分化率，一般比对照提高100％，并且培育壮苗。该方法解决了甘蔗组织培养中某些品种能够正常诱导愈伤组织但分化困难的问题，有效完善了甘蔗组培再生体系，极显著提高愈伤组织分化率，促进组织培养在良种快繁中的广泛应用。
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