公开(公告)号：CN111500560B

公开(公告)日：2022-12-27

申请号：CN202010342426.0

申请日：2020-04-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  夏伟 ,  徐星豪 ,  黄燕

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种噬热β‑葡萄糖苷酶的制备及应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过构建重组菌，异源表达了来源于嗜热真菌Talaromyces piceae的β‑葡萄糖苷酶TpBgl3A，所述重组菌在3.6L发酵罐中产酶可达2324U/mL。生产得到的β‑葡萄糖苷酶TpBgl3A能在较低加酶量下利用葡萄糖为底物高转化率制备低聚龙胆糖，显著降低生产成本；在以葡萄糖和纤维二糖为底物的反应体系中，低聚龙胆糖转化率达到26.2％，具有工业化生产低聚龙胆糖的潜力。

公开(公告)号：CN112094835B

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN202011015343.7

申请日：2020-09-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 黄燕 ,  夏伟 ,  许俊勇 ,  盛玲玲 ,  吴敬

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/02 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12P19/04 ,  C12P19/44 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体的应用，属于酶工程技术领域。本发明通过定点突变构建获得转苷/水解比提高的β‑葡萄糖苷酶突变体G224A、G224N、G224V，在最优条件下，制备低聚半乳糖产率分别为46.7％、43.8％和38.4％，分别是野生型的1.84倍、1.73倍和1.51倍；制备己基糖苷的产率分别为51.8％、56.9％和38.8％，分别是野生型的2.79倍、3.07倍和2.09倍，具有较好的工业化应用潜力。

公开(公告)号：CN112063605B

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN202011015802.1

申请日：2020-09-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  夏伟 ,  许俊勇 ,  徐星豪 ,  黄燕

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00

Abstract: 本发明公开了一种复合酶催化纤维素制备低聚龙胆糖的方法及其应用，属于酶工程技术领域。本发明在Thermotoga sp.KOL6来源的β‑葡萄糖苷酶基础上，通过定点突变的方式获得突变体，以巴斯德毕赤酵母KM71为表达宿主，实现突变体基因在毕赤酵母中的高效表达。同时，本发明的复合酶可有效转化纤维素生成低聚龙胆糖；以磷酸膨胀纤维素和葡萄糖为底物酶催化转化制备低聚龙胆糖，复配纤维素酶和β‑葡萄糖苷酶突变体Q34G/Y200F时，原料的总转化率19.1％，相比野生型β‑葡萄糖苷酶分别提高74.7％。本发明的技术方案具有很高的工业应用价值。

公开(公告)号：CN111593034A

公开(公告)日：2020-08-28

申请号：CN202010590774.X

申请日：2020-06-24

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  夏伟 ,  徐星豪

IPC: C12N9/24 ,  C12N9/42 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及利用β-1,6-葡聚糖酶制备低聚龙胆糖的方法及其应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明首先提供了一种利用对龙胆二糖具有转糖基活性的β-1,6-葡聚糖酶TcBgn，其可在加酶量较低的情况下将葡萄糖转化为低聚龙胆糖，且转化率高，可显著降低生产成本。本发明还将β-1,6-葡聚糖酶与β-葡萄糖苷酶双酶复配制备低聚龙胆糖，利用双酶复配体系将葡萄糖转化为龙胆二糖和龙胆三糖，转化率高，且显著提高了龙胆三糖在产物中的比重。因而，β-1,6-葡聚糖酶单酶或双酶复配制备低聚龙胆糖的方法，均具有较好的工业化应用价值。

公开(公告)号：CN111500560A

公开(公告)日：2020-08-07

申请号：CN202010342426.0

申请日：2020-04-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  夏伟 ,  徐星豪 ,  黄燕

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种噬热β-葡萄糖苷酶的制备及应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过构建重组菌，异源表达了来源于嗜热真菌Talaromyces piceae的β-葡萄糖苷酶TpBgl3A，所述重组菌在3.6L发酵罐中产酶可达2324U/mL。生产得到的β-葡萄糖苷酶TpBgl3A能在较低加酶量下利用葡萄糖为底物高转化率制备低聚龙胆糖，显著降低生产成本；在以葡萄糖和纤维二糖为底物的反应体系中，低聚龙胆糖转化率达到26.2％，具有工业化生产低聚龙胆糖的潜力。

公开(公告)号：CN111411117A

公开(公告)日：2020-07-14

申请号：CN202010342196.8

申请日：2020-04-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴敬 ,  夏伟 ,  盛玲玲 ,  黄燕

IPC: C12N15/56 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种耐热β-葡萄糖苷酶在低聚龙胆糖制备中的应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于Thermotoga sp.KOL6的β-葡萄糖苷酶TSBGl的基因以Bacillus subtilis WSH11为表达宿主，实现tsbgl基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达。所述β-葡萄糖苷酶TSBGl的最适温度为90℃，最适pH为6.0，在90℃下具有较高的热稳定性。将所述β-葡萄糖苷酶添加至以1200g/L葡萄糖为底物的反应体系中，在pH6.0，90℃下进行酶反应，低聚龙胆糖的产量达到178.2g/L。此酶适合食品等工业应用的需要，可用于低聚龙胆糖的工业化生产。