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公开(公告)号:CN110317800B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN201910572985.8
申请日:2019-06-27
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种用重组短芽孢杆菌生产磷脂酶D的方法,以含有来源于Streptomyces antibioticus的PLD基因序列的质粒pUC57‑PLD anti为模板,扩增PLD基因;将PLD基因与载体PNCMO2连接得到质粒PNCMO2/PLD,然后转化进E.coli保存;随后从E.coli中提取质粒PNCMO2/PLD转化进B.choshinensis得到重组菌B.choshinensis/PNCMO2‑PLD,然后发酵培养,胞外表达PLD。本发明中的重组质粒稳定,细胞毒性小,可实现高密度胞外表达磷脂酶D。
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公开(公告)号:CN110305129B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201910707958.7
申请日:2019-08-01
Applicant: 厦门大学
IPC: C07D471/14
Abstract: 三区带异步切换模拟移动床分离吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法,涉及吴茱萸碱和吴茱萸次碱分离的技术领域。将吴茱萸碱和吴茱萸次碱样品与甲醇水溶液混合得到进样溶液,以十八烷基硅烷键合的球形硅胶C18为固定相,甲醇水溶液为流动相,将进样溶液经过三区带异步切换模拟移动床进行分离,得到高纯度的单一吴茱萸碱和吴茱萸次碱;具有产量高,连续化、自动化生产等优点,是一种极具商业化的生产模式。
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公开(公告)号:CN108129529A
公开(公告)日:2018-06-08
申请号:CN201810031669.5
申请日:2018-01-12
Applicant: 厦门大学
IPC: C07H15/256 , C07H1/06
CPC classification number: C07H15/256 , C07H1/06
Abstract: 本发明提供了一种分离纯化甜菊糖单体的方法,属于分离提纯技术领域,具体包括:将甜菊糖样品与乙腈水溶液混合得到甜菊糖样品液,以氨基填料为固定相,乙腈水溶液为流动相,将样品液经过三区带模拟移动床色谱分离体系进行分离得到甜菊苷和莱胞迪苷A。本发明运用三区带模拟移动床色谱分离系统,从甜菊糖中离出的甜菊苷和莱胞迪苷A纯度高,且分离工艺简单,流程连续且自动化,产率高,溶剂消耗低且可以重复利用,实现了清洁生产。
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公开(公告)号:CN104593278B
公开(公告)日:2017-05-03
申请号:CN201510058160.6
申请日:2015-02-04
Applicant: 厦门大学
Abstract: 固定化脂肪酶的制备方法,涉及固定化脂肪酶。将菌种活化、培养后上罐发酵得游离酶液;将无水乙醇和去离子水混合,再加入氨水,混合后,加入TEOS,再离心收集白色沉淀,洗涤和干燥,然后超声分散在去离子水中,加入CTAB溶液和Na2CO3,离心收集沉淀后,洗涤和干燥,得到HMSS;将HMSS超声分散在甲苯中,磁力搅拌、冷凝回流后,加入(EtO)3SiPrCN,回流,离心收集产品,洗涤和干燥后,得改性产物HMSS‑CN;再将改性产物在硫酸中回流,离心收集产物,洗涤和干燥后,得产物HMSS‑COOH,再与游离酶液混合,在冰浴下搅拌,离心收集沉淀,并用磷酸钾缓冲液洗涤,冷冻干燥后,即得到固定化脂肪酶。
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公开(公告)号:CN106011196A
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201610339049.9
申请日:2016-05-19
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12P19/04 , C08B37/0003
Abstract: 一种鼠李糖乳杆菌胞外多糖的提纯方法,涉及胞外多糖。从保种的MRS固体培养基上选取单菌落接至MRS液体培养基中培养得已活化的发酵液;在MRS液体培养基中添加终浓度为10mM的CaCl2,取已活化的发酵液进行转接,得转接后的发酵液,取培养0,2,4,6,12,24h的1ml转接后的发酵液测定OD600、pH值;取中转接后的发酵液,除去细胞与蛋白之后,加入冰乙醇,冰箱里过夜,离心,去除上清留沉淀,将沉淀冷冻干燥后取出,透析,再冷冻干燥后即得粗胞外多糖,然后溶解于纯水中,取经过透析冻干后的粗胞外多糖样品溶于蒸馏水中,配制20mg/mL的溶液,离心,取上清液离子柱层析得鼠李糖乳杆菌胞外多糖。
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公开(公告)号:CN105385675A
公开(公告)日:2016-03-09
申请号:CN201511031787.9
申请日:2015-12-31
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12N11/08 , C12N9/20 , C12Y301/01003
Abstract: 一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法,涉及脂肪酶B。提供酶的贮存稳定性高、便于回收且可重复利用,有利于工业化应用的一种南极假丝酵母脂肪酶B的固定化方法。1)先将巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB进行斜面种子培养、活化种子培养和一级种子培养,然后再接入含BSM培养基的发酵罐中发酵培养,获得南极假丝酵母脂肪酶B;斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)CALB,保藏编号:CGMCC NO.10277;2)将预处理后的树脂加入含有南极假丝酵母脂肪酶B发酵液的发酵罐,使树脂处于悬浮状态下吸附;3)将步骤2)中吸附后的树脂筛出,水洗,冷冻干燥。
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公开(公告)号:CN104593278A
公开(公告)日:2015-05-06
申请号:CN201510058160.6
申请日:2015-02-04
Applicant: 厦门大学
Abstract: 固定化脂肪酶的制备方法,涉及固定化脂肪酶。将菌种活化、培养后上罐发酵得游离酶液;将无水乙醇和去离子水混合,再加入氨水,混合后,加入TEOS,再离心收集白色沉淀,洗涤和干燥,然后超声分散在去离子水中,加入CTAB溶液和Na2CO3,离心收集沉淀后,洗涤和干燥,得到HMSS;将HMSS超声分散在甲苯中,磁力搅拌、冷凝回流后,加入(EtO)3SiPrCN,回流,离心收集产品,洗涤和干燥后,得改性产物HMSS-CN;再将改性产物在硫酸中回流,离心收集产物,洗涤和干燥后,得产物HMSS-COOH,再与游离酶液混合,在冰浴下搅拌,离心收集沉淀,并用磷酸钾缓冲液洗涤,冷冻干燥后,即得到固定化脂肪酶。
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公开(公告)号:CN101985638A
公开(公告)日:2011-03-16
申请号:CN201010579428.8
申请日:2010-12-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 前体流加发酵生产L-色氨酸的方法,涉及L-色氨酸。先对ATCC 27325进行筛选,制作成冷冻甘油管,然后接种于一级摇瓶种子培养基培养成一级种子,再接种于种子罐中培养成二级种子,最后接种于装有发酵培养基的发酵罐中发酵,发酵采用在菌体进入对数期时开始流加浓度为200~300g/L的邻氨基苯甲酸,初始流加速度为0.1~0.3g/L/h,之后逐渐增大,至发酵结束时流加速度为0.6~0.8g/L/h。采用发酵法生产的L-色氨酸的产量可达40~50g/L,糖酸转化率20%~22%,且发酵周期短,生产工艺简单,生产成本低,可满足工业化生产L-色氨酸的要求,具有很大的应用前景。
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公开(公告)号:CN101550194A
公开(公告)日:2009-10-07
申请号:CN200910111757.7
申请日:2009-05-12
Applicant: 厦门大学
IPC: C08B5/14
Abstract: 纤维素硫酸钠的制备方法,涉及一种微胶囊的制备方法。提供一种成本低、工艺流程简便的纤维素硫酸钠的制备方法。将硫酸和无水乙醇分别冷冻至-18~-22℃;将硫酸倒入无水乙醇中,搅拌得反应液;待温度回升至-6~6℃,将纤维素投入反应液中,混匀后静置反应;分离纤维素与反应液,除去纤维素上吸附的反应液,洗涤;将洗涤过的纤维素用去离子水溶解,再用NaOH调pH至1.5~3.0,搅拌;离心或抽滤除去未溶解的纤维素,保留上清,用NaOH调pH至9~10;在上清中加入乙醇,沉淀出纤维素硫酸钠,收集沉淀,烘干,得到纤维素硫酸钠。
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