一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法

    公开(公告)号:CN104131092B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410349635.2

    申请日:2014-07-22

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体公开一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本发明针对目前SNP鉴定的局限性,将多重PCR、巢式PCR、等位特异性PCR相结合,提出基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本方法利用多重PCR实现2~4个基因片段扩增,提高实验效率,降低实验成本;利用巢式PCR提高扩增片段特异性,获得高质量、浓度均一的DNA模板,提高HRM技术稳定性;利用等位特异性PCR,实现SNP位点判别,避免荧光标记的设定或繁琐的电泳及酶切操作;通过上述方法的综合运用,实现多个SNP的批量鉴定、降低实验成本。

    应用iTRAQ技术研究水稻响应稻瘟病菌侵染蛋白质组变化的方法

    公开(公告)号:CN104820103A

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201510228255.8

    申请日:2015-05-06

    CPC classification number: G01N33/6848

    Abstract: 本发明公开了一种应用iTRAQ技术研究水稻响应稻瘟病菌侵染蛋白质组变化的方法,属于植物生物技术领域。本发明的方法包含以下步骤:A.植物材料与叶片蛋白的提取;B.对步骤A所得的蛋白质样品进行进一步FASP酶解、肽段标记、SCX分级及LC-MS质谱分析;C.对上步所得的质谱鉴定结果进行数据查库、定量分析,获取水稻-稻瘟病菌互作过程中整个蛋白质组的变化情况。本发明能快速和有效地筛选到与水稻抗病相关联的候选基因;很好的利用iTRAQ这一高通量、准确的蛋白质组学研究手段来研究与水稻抗病相关的候选基因;可广泛应用于植物抗病等性状的研究和开发并且结合转基因技术来培育抗病性强的植物新品种。

    一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789655A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126951.8

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pik-O-F、Pik-O-R和一对内引物Pik-T-F、Pik-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pik基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pik基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789654A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126909.6

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种稻瘟病抗性基因Pita的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pita-O-F、Pita-O-R和一对内引物Pita-T-F、Pita-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示。利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pita基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pita基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种批量提取水稻胚乳DNA的方法

    公开(公告)号:CN103436524A

    公开(公告)日:2013-12-11

    申请号:CN201310238655.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方法包括如下步骤:S1.从水稻种子中切取胚乳;S2.将胚乳投入PCR板(T1板)孔中;S3.T1板每孔加入碱液,放入PCR仪中进行加热;S4.取出T1板,每孔投入钨合金珠及1×DNA抽提液;S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热;S6.取出T1板,振动;S7.将T1板放入离心机进行离心;S8.取出T1板,将上清液转移至另一PCR板(T3板)中,T3板每孔中预先加入双蒸水;S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法快速、操作简单,可实现水稻胚乳DNA的批量提取。

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