百合叶肉原生质体的制备方法

    公开(公告)号:CN109136167B

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN201810762876.8

    申请日:2018-07-12

    Abstract: 本发明公开了百合叶肉原生质体的制备方法,包括步骤:(1)取带有未开放花蕾的百合植株,进行暗处理;(2)取植株的叶片,清洗、消毒;(3)向叶肉材料中加入酶解溶液,于暗处真空抽提,然后暗处静置酶解数小时,得到含有叶肉原生质体的酶解液;(4)所得酶解液用W5溶液稀释,网筛过滤,所得滤液经低速离心,弃上清,用W5溶液重悬原生质体沉淀,低速离心,弃上清,重复洗一次;用MMG溶液重悬原生质体沉淀。本发明克服了百合叶肉原生质体分离效率低的问题,有效建立了百合叶肉原生质体制备的方法。

    一种紫薇原生质体的制备方法

    公开(公告)号:CN113652390A

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202111108086.6

    申请日:2021-09-22

    Abstract: 本发明涉及植物原生质体技术领域,具体涉及一种紫薇原生质体的制备方法。本发明针对紫薇提供原生质体的制备方法,该方法以紫薇叶片为材料,将紫薇叶片去除下表皮,将去除下表皮的叶片在酶解液中酶解处理,得到酶解溶液,将所述酶解溶液经分离得到叶肉酶解产物,经洗涤后分离得到叶肉原生质体。该方法能够高效地从紫薇叶片中提取获得原生质体,制备的原生质体具有较高的完整性和活性,为紫薇的分子育种提供了基础。

    TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法

    公开(公告)号:CN110499325A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201910630368.9

    申请日:2019-07-12

    Abstract: 本发明提供一种TRV-based病毒诱导的报春花属植物基因沉默的方法。包括:A、根据报春花属植物目标基因,设计引物并扩增出该目标基因的DNA片段;B、将DNA片段连接到pTRV2载体上,得到重组载体;C、将pTRV1、重组载体分别转化农杆菌,所得转化子共同侵染植株。本发明首次证明TRV可成功应用于小报春基因沉默和功能验证,为报春花属植物的基因功能验证奠定了基础。本发明方法简单、研究周期短、无需基因全长和转化体系,获得目的表型效率高,可实现大量基因的快速功能验证。与现有的VIGS体系相比,本发明表型持续时间长,且在植株的不同部位均出现表型变化,对报春花属异型自交不亲和的遗传学研究具有重要意义。

    一种观察月季黑斑病侵染过程的石蜡切片染色方法

    公开(公告)号:CN107576552A

    公开(公告)日:2018-01-12

    申请号:CN201710756558.6

    申请日:2017-08-29

    Abstract: 本发明涉及一种观察月季黑斑病侵染过程的石蜡切片染色方法,在切片脱蜡至水后,先用1%结晶紫水溶液进行染色,再利用碘液进行媒染,最后用95%酒精进行脱色。选择上述两种染液和脱色方法,可将组织细胞染为蓝色,将菌丝染色为红色,为观察黑斑病病程发展过程的观察的提供了方法。而且本发明的方法通过改进的染色方法,大大缩短了利用石蜡切片观察月季黑斑病侵染叶片进程的染色时间,提高了试验效率。

    一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法

    公开(公告)号:CN104145807A

    公开(公告)日:2014-11-19

    申请号:CN201410366170.1

    申请日:2014-07-29

    Abstract: 本发明公开了一种获得连翘属与六道木叶属属间杂种的方法,具体步骤如下:1)以连翘属的连翘为母本,以六道木叶属的翅果连翘为父本,进行属间人工杂交,收取杂交后的种子;2)种植种子获得杂交后代材料,参照父本和母本进行形态学观察统计,并采用AFLP分子标记进行杂种鉴定,选取连翘属与六道木叶属属间杂种。本发明利用连翘属连翘与六道木叶属翅果连翘进行远缘杂交,实现了连翘属与六道木叶属属间基因交流,获得了属间杂交新种质。在本发明基础上,可丰富连翘属植物的遗传信息,为利用属间杂交进行连翘新品种培育成为可能,同时可进行近缘属亲缘关系研究。

    一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法

    公开(公告)号:CN103305614A

    公开(公告)日:2013-09-18

    申请号:CN201310223882.3

    申请日:2013-06-06

    Abstract: 本发明涉及一种紫薇属植物染色体的原位杂交方法,包括制片、制备探针、杂交前预处理、制备杂交液、探针变性与染色体变性、杂交和检测七个步骤。以紫薇属植物中期染色体作为靶DNA,以玉米45S rDNA为探针,将玉米45S rDNA探针清晰的定位在紫薇属植物染色体上。本发明所述的杂交方法能有效消除背景干扰,提高检测灵敏度和准确性,可以较好的应用于紫薇属等小染色体植物的染色体检测,为紫薇属植物染色体的深入研究,提供了新的途径和方法。

    班克木培养基及组织培养与快速繁殖方法

    公开(公告)号:CN102283112B

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201110164827.2

    申请日:2011-06-17

    Abstract: 本发明提供了用于班克木的培养基,以及班克木的组织培养与快速繁殖方法。所述班克木专用培养基为改良WPM培养基,包含下列元素成分:NH4NO3,200~400mg/L;Ca(NO3)24H2O,250~600mg/L;KCl,400~900mg/L;CaCl22H2O,90~200mg/L;MgSO4,180~400mg/L;所述班克木组织培养与快速繁殖方法,包括外植体的消毒和无菌苗的获得,腋芽诱导和继代培养,生根培养和试管苗移栽。本发明提供的班克木培养基和组织培养方法极大地提高了班克木的繁殖系数和生根率,建立了一套完整的快速繁殖技术体系,为班克木的大面积推广应用提供了技术支持。

    一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法

    公开(公告)号:CN102228004B

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201110121244.1

    申请日:2011-05-11

    Abstract: 本发明提供了一种胭脂花组培繁殖的种质保存方法,包括低温处理后的外植体经表面灭菌后,进行不定芽的诱导,所述的不定芽的诱导培养基为以MS为基本培养基,添加0.2~1.0mg/L 6-BA,0~0.2mg/L IBA,20~40g/L蔗糖的固体培养基,pH为5.9~6.0。本发明提供的组培繁殖胭脂花种质保存方法稳定可靠,可重复性强,为胭脂花优良单株的保存提供了技术保障。

    一种澳蜡花试管苗继代增殖培养方法

    公开(公告)号:CN102177848B

    公开(公告)日:2012-11-21

    申请号:CN201110067483.3

    申请日:2011-03-21

    Inventor: 李青 孟会 潘会堂

    Abstract: 本发明公开了一种澳蜡花试管苗继代增殖培养基及其应用和澳蜡花试管苗继代增殖培养的方法。所述的澳蜡花试管苗继代增殖培养基,其是以MS培养基为基本培养基的固体培养基,其还含有0.1~2.0mg/L的6-BA、0.01~0.2mg/L的IBA、20~40g/L的蔗糖,其中所述MS培养基中的KH2PO4的含量是原量的1/4至全量。用本发明方法繁殖澳蜡花的增殖系数可达8.68,相对于澳蜡花的常规繁殖方法扦插,有利于保持母本的优良性状、缩短生产周期、扩大生产规模。

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